序論：在您撰寫(xiě)血液分析儀溯源校準(zhǔn)和質(zhì)量控制研究時(shí)，參考他人的優(yōu)秀作品可以開(kāi)闊視野，小編為您整理的1篇范文，希望這些建議能夠激發(fā)您的創(chuàng)作熱情，引導(dǎo)您走向新的創(chuàng)作高度。

血液分析儀在臨床中有著非常廣泛的應(yīng)用，其檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性直接影響臨床醫(yī)生對(duì)疾病的臨床診斷和治療。隨著儀器技術(shù)的進(jìn)步，血液分析儀變得越來(lái)越復(fù)雜，全血計(jì)數(shù)中的定量參數(shù)越來(lái)越多。近年正從單機(jī)檢測(cè)轉(zhuǎn)向流水線檢測(cè)，血液分析流水線由血液分析儀、推片染色機(jī)、糖化血紅蛋白血液儀、蛋白分析儀等檢測(cè)模塊通過(guò)軌道連接組成，可使用一管血、一次上機(jī)即可得到多個(gè)檢測(cè)的結(jié)果。為臨床檢驗(yàn)人員提供了高效快捷的工作流程，縮短了患者等候檢驗(yàn)報(bào)告的時(shí)間，極大地提高了臨床檢測(cè)效率。同時(shí)，檢測(cè)項(xiàng)目不再局限于血常規(guī)檢測(cè)，新增了HbA1c、CRP和SAA等聯(lián)合檢測(cè)功能，這也對(duì)檢測(cè)結(jié)果的溯源校準(zhǔn)提出了新的需求。邁瑞作為國(guó)內(nèi)最大的血液分析儀制造商，建立了完善的血液分析溯源體系，以保證用戶端臨床檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。血液分析儀的溯源標(biāo)準(zhǔn)化工作主要由ICSH（國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)）來(lái)推動(dòng)，目前國(guó)際上已經(jīng)發(fā)布了多個(gè)參考方法，衛(wèi)生部已將這些參考方法轉(zhuǎn)化為行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)指導(dǎo)檢測(cè)結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)施。但參考方法運(yùn)行需要專門的儀器設(shè)備，并且速度慢、操作復(fù)雜，對(duì)人員操作要求高，如果由臨床實(shí)驗(yàn)室執(zhí)行，費(fèi)時(shí)費(fèi)力。國(guó)內(nèi)外的法規(guī)都已明確要求制造商提供有溯源性的校準(zhǔn)品。本文詳細(xì)介紹了邁瑞血液分析儀溯源校準(zhǔn)和質(zhì)量控制的實(shí)施過(guò)程，內(nèi)部溯源傳遞始于制造商產(chǎn)品校準(zhǔn)品的值，止于所使用的計(jì)量上最高參考標(biāo)準(zhǔn)，通過(guò)不間斷地比較鏈溯源至目前最高級(jí)計(jì)量級(jí)別的參考級(jí)別的參考方法或參考物質(zhì)[1]。

1最高參考標(biāo)準(zhǔn)

1.1參考方法和參考實(shí)驗(yàn)室的建立

目前已建有WBC、RBC、HGB、HCT（MCV）、PLT、RET計(jì)數(shù)和白細(xì)胞分類7個(gè)參考方法，參考方法執(zhí)行過(guò)程中對(duì)儀器設(shè)備、試劑、人員、環(huán)境等均有嚴(yán)格要求。通用要求：環(huán)境要求18～25℃，人員經(jīng)過(guò)培訓(xùn)，考核合格后才能上崗操作。配制試劑均滿足臨床實(shí)驗(yàn)室I級(jí)用水；樣本稀釋使用硅硼玻璃的A級(jí)容量瓶；因血液有一定黏度，所有參考方法加樣使用正向置換式移液器，減少黏度的影響，準(zhǔn)確度為±0.5%，等等。紅細(xì)胞和白細(xì)胞參考方法：采用ICSH1994年發(fā)布的參考方法，使用單通道阻抗原理的半自動(dòng)粒子計(jì)數(shù)器，通過(guò)梯度稀釋血液樣本，對(duì)結(jié)果進(jìn)行重疊校準(zhǔn)。使用的庫(kù)爾特粒子計(jì)數(shù)器小孔直徑為80～100μm，樣本檢測(cè)體積準(zhǔn)確度小于1%，溫度對(duì)體積的影響每攝氏度小于0.1%；每個(gè)樣本梯度稀釋4個(gè)水平，重復(fù)配制2次，對(duì)8個(gè)結(jié)果進(jìn)行直線回歸分析，回歸直線與Y軸的交點(diǎn)，代表樣本無(wú)限稀釋后，細(xì)胞可以一個(gè)一個(gè)通過(guò)小孔被檢測(cè)，即代表重疊校準(zhǔn)的計(jì)數(shù)值。例如，梯度稀釋的重疊校準(zhǔn)后，紅細(xì)胞參考方法結(jié)果為4.77，如圖1所示。血紅蛋白參考方法：采用了CLSIH15-A2發(fā)布的參考方法，使用氰化高鐵血紅蛋白法，在雙光束的分光光度計(jì)上進(jìn)行檢測(cè)。分光光度計(jì)狹縫寬度小于等于2nm；配對(duì)石英比色杯，內(nèi)徑為（1.000±0.002）cm。樣本重復(fù)稀釋2次，紅細(xì)胞溶解后，使用0.20～0.25μm的薄膜過(guò)濾器進(jìn)行過(guò)濾，排除氣泡雜質(zhì)等影響。檢測(cè)504nm、540nm、750nm波長(zhǎng)下的吸光度。檢查氰化高鐵血紅蛋白溶液純度1.59≤A540nm/A504nm≤1.63，濁度A750nm≤0.003。計(jì)算540nm下血紅蛋白的濃度。紅細(xì)胞壓積參考方法：采用了CLSIH7-A3發(fā)布的參考方法，使用微量壓積離心機(jī)離心血樣后，在顯微鏡下使用游標(biāo)卡尺讀取紅細(xì)胞柱和全血柱的長(zhǎng)度進(jìn)行計(jì)算，本方法未修正殘留血漿的影響。微量壓積離心機(jī)半徑大于8.0cm，離心5min轉(zhuǎn)子溫度不超過(guò)45℃。毛細(xì)胞符合美國(guó)材料實(shí)驗(yàn)協(xié)會(huì)的要求。血小板參考方法：采用了ICSH2001年發(fā)布的流式細(xì)胞儀法和WHO人工相差顯微鏡鏡檢法2個(gè)方法互相比對(duì)。流式細(xì)胞儀法準(zhǔn)確性高，但有受抗體質(zhì)量影響的風(fēng)險(xiǎn)；鏡檢法準(zhǔn)確性差，但穩(wěn)定不受其他因素影響。使用CD41和CD61兩個(gè)抗體染料，檢測(cè)信號(hào)不少于5000個(gè)，得到紅細(xì)胞與血小板的比值，再乘以紅細(xì)胞參考方法的值，間接計(jì)算血小板值。網(wǎng)織紅細(xì)胞和白細(xì)胞分類參考方法：分別采用ICSH1998年發(fā)布的新亞甲藍(lán)法和CLSIH20-A中的人工鏡檢法。這2個(gè)方法對(duì)于血涂片的制備以及鏡檢人員的能力均有很高要求，所有的鏡檢人員均經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的專業(yè)培訓(xùn)，考核合格后方上崗。參考實(shí)驗(yàn)室：為確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，參考方法必須由參考實(shí)驗(yàn)室執(zhí)行。邁瑞參考實(shí)驗(yàn)室按照ISO17025和ISO15195的要求[2-3]，建立了完善的質(zhì)量管理體系，并在2009年通過(guò)了中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì)（CNAS）認(rèn)可，保證了實(shí)驗(yàn)室參考測(cè)量技術(shù)能力的保持與提升。

1.2參考物質(zhì)

可溯源至參考物質(zhì)的項(xiàng)目包括HbA1c、CRP和SAA等?；Q性是參考物質(zhì)的重要屬性。當(dāng)參考物質(zhì)用于制造商溯源程序?yàn)楫a(chǎn)品校準(zhǔn)品定值時(shí)，首先必須驗(yàn)證是否具有互換性[4]。如果產(chǎn)品校準(zhǔn)品溯源至沒(méi)有互換性的參考物質(zhì)，將導(dǎo)致不同常規(guī)程序測(cè)量病人樣本沒(méi)有可比性。當(dāng)驗(yàn)證時(shí)發(fā)現(xiàn)沒(méi)有互換性，但已被證明在其他多個(gè)測(cè)量程序中是有互換性，可修正沒(méi)有互換性的偏差，并記錄使用和驗(yàn)證的詳細(xì)過(guò)程[1]。修正方案參考IFCC互換性工作組推薦的技術(shù)指南，包括開(kāi)發(fā)和應(yīng)用沒(méi)有互換性偏差的特定修正因子和函數(shù)及其不確定度，以及在校準(zhǔn)層級(jí)中應(yīng)用修正步驟的位置，實(shí)現(xiàn)臨床結(jié)果到參考物質(zhì)的可追溯性[5]。

2溯源傳遞至產(chǎn)品校準(zhǔn)品的過(guò)程

2.1溯源傳遞及產(chǎn)品校準(zhǔn)品定值

針對(duì)每個(gè)項(xiàng)目都詳細(xì)定義溯源層級(jí)，并繪制溯源鏈。為減少測(cè)量不確定度，溯源過(guò)程應(yīng)盡量減少中間傳遞過(guò)程，盡可能直接溯源至參考測(cè)量程序或參考物質(zhì)。例如WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、PLT等項(xiàng)目均使用參考方法測(cè)試新鮮血，直接校準(zhǔn)血液分析儀標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量程序，然后給產(chǎn)品校準(zhǔn)品定值。但如果參考測(cè)量程序或參考物質(zhì)有限，可以增加適當(dāng)?shù)墓ぷ餍?zhǔn)品。但在沒(méi)有合適的參考測(cè)量程序或參考物質(zhì)時(shí)，會(huì)建立內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)，這種情況通常是新發(fā)現(xiàn)的分析物或是參考基準(zhǔn)建立困難的情況。但是無(wú)論是哪種情況下，都會(huì)確保臨床結(jié)果有適合的溯源校準(zhǔn)水平。此外，溯源傳遞設(shè)計(jì)的過(guò)程中也必須結(jié)合產(chǎn)品需要考慮被測(cè)量是否相同。例如CRP項(xiàng)目溯源，使用的參考物質(zhì)ERM474是血清中的CRP質(zhì)量濃度值，而流水線直接檢測(cè)的是全血中的CRP質(zhì)量濃度值，需要通過(guò)紅細(xì)胞壓積（HCT）建立血清體積和全血體積的修正因子，報(bào)告CRP血清濃度=CRP全血質(zhì)量濃度/HCT，其測(cè)量結(jié)果的溯源需合并CRP和HCT兩個(gè)溯源路徑。血液分析儀一體機(jī)CRP血清濃度溯源量值圖如圖2所示。

2.2產(chǎn)品校準(zhǔn)品定值

使用參考標(biāo)準(zhǔn)或工作校準(zhǔn)品校準(zhǔn)制造商標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量程序，產(chǎn)品校準(zhǔn)品通過(guò)重復(fù)測(cè)量，計(jì)算平均值得到靶值，并評(píng)估測(cè)量不確定度。產(chǎn)品校準(zhǔn)品的不確定度應(yīng)包括所有較高計(jì)量水平的測(cè)量程序和參考標(biāo)準(zhǔn)的不確定度分量總和。

2.3儀器、試劑的質(zhì)量管理

儀器、試劑的制造質(zhì)量易受物料質(zhì)量、產(chǎn)品設(shè)計(jì)和生產(chǎn)制造水平等多種因素影響。邁瑞在設(shè)計(jì)開(kāi)發(fā)時(shí)既充分考慮這些影響，為檢測(cè)系統(tǒng)的分析應(yīng)用和性能設(shè)定目標(biāo)，并在血液分析儀、試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品的生產(chǎn)和設(shè)計(jì)過(guò)程中，對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行初始確認(rèn)，確認(rèn)方案參考CLSIH26-A2《自動(dòng)血液分析的確認(rèn)、驗(yàn)證和質(zhì)量保證》和《ICSH血細(xì)胞分析儀包括用于微分白細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的評(píng)價(jià)指南》[6-7]而制定的。在實(shí)際工作中，會(huì)為每個(gè)檢測(cè)制定性能目標(biāo)，通過(guò)遵循嚴(yán)格的來(lái)料檢驗(yàn)、生產(chǎn)過(guò)程管理、出廠檢驗(yàn)等質(zhì)量體系管理要求，嚴(yán)格控制生產(chǎn)各個(gè)環(huán)節(jié)，確保出廠的血液分析儀臺(tái)間、試劑批間一致。血液分析儀使用的質(zhì)控品、校準(zhǔn)品，包括EQA室間質(zhì)評(píng)樣本，因人血細(xì)胞保存困難，目前基本上都是經(jīng)過(guò)處理的人源細(xì)胞、動(dòng)物源細(xì)胞、人工合成物質(zhì)模擬制備，所以無(wú)法避免基質(zhì)效應(yīng)的影響。所以在開(kāi)發(fā)設(shè)計(jì)時(shí)會(huì)充分評(píng)估儀器型號(hào)間的差異，如果儀器型號(hào)間有明顯差異，會(huì)按儀器型號(hào)提供專有靶值，杜絕型號(hào)間差異對(duì)臨床結(jié)果的影響。而且筆者們也與衛(wèi)生部臨檢中心等EQA組織持續(xù)保持溝通，對(duì)有差異的型號(hào)分組進(jìn)行評(píng)價(jià)，避免對(duì)臨床儀器的錯(cuò)誤評(píng)估。

3臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)化

檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確是臨床診治的前提條件，理想情況下，同一患者樣本無(wú)論何時(shí)、何地，使用不同的血液分析儀檢測(cè)，測(cè)量結(jié)果都應(yīng)該一致，只可能受生物學(xué)變異的影響。為達(dá)到此目標(biāo)，最有效的手段就是減少分析過(guò)程中的誤差，包括溯源校準(zhǔn)、質(zhì)量控制兩大方面，這需要國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織、制造商和臨床實(shí)驗(yàn)室的共同努力。校準(zhǔn)通過(guò)調(diào)整儀器排除誤差，并通過(guò)質(zhì)量控制保證儀器校準(zhǔn)的穩(wěn)定性。血液分析儀投入使用前必須經(jīng)過(guò)校準(zhǔn)，并且每半年或有需要時(shí)進(jìn)行復(fù)校準(zhǔn)[8]，確保了檢測(cè)結(jié)果的溯源性。邁瑞提供的校準(zhǔn)品均滿足溯源性要求，并可為用戶提供規(guī)范的定期校準(zhǔn)服務(wù)；用戶端也可直接使用廠家配套的校準(zhǔn)品，按專有的校準(zhǔn)界面，自行進(jìn)行校準(zhǔn)過(guò)程。同時(shí)，邁瑞為臨床實(shí)驗(yàn)室積極開(kāi)展質(zhì)量控制活動(dòng)提供完善的配套服務(wù)，包括室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)，其中參加室間質(zhì)評(píng)費(fèi)用較高，且受周期的限制，每半年或1年才能評(píng)估儀器狀態(tài)。為突破以上限制，邁瑞配套推出了MRHCP廠家實(shí)時(shí)在線質(zhì)量控制平臺(tái)，利用室內(nèi)質(zhì)量控制數(shù)據(jù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)。通過(guò)該平臺(tái)，不僅能夠方便地獲得室內(nèi)質(zhì)控統(tǒng)計(jì)報(bào)告，而且可以實(shí)時(shí)與全球多家實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行對(duì)比，評(píng)估儀器的準(zhǔn)確度、精密度，促進(jìn)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力的提升。除校準(zhǔn)和質(zhì)量控制的影響外，其實(shí)際檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性還受其他分析前、分析中、分析后很多環(huán)節(jié)的影響。在產(chǎn)品設(shè)計(jì)開(kāi)發(fā)過(guò)程中，已充分考慮各種因素，確保在進(jìn)樣系統(tǒng)、故障報(bào)警、維護(hù)保養(yǎng)等程序設(shè)計(jì)時(shí)維持儀器的最佳使用狀態(tài)。如流水線的進(jìn)樣系統(tǒng)可以實(shí)現(xiàn)樣本自動(dòng)條碼掃描，并按檢測(cè)項(xiàng)目自動(dòng)調(diào)配上機(jī)，避免了樣本進(jìn)樣錯(cuò)誤。

4測(cè)量不確定度

測(cè)量結(jié)果的計(jì)量溯源性通過(guò)測(cè)量程序和校準(zhǔn)物質(zhì)交替的不間斷比較鏈（比較鏈可逐級(jí)向上減少測(cè)量的不確定度），實(shí)現(xiàn)計(jì)量學(xué)上的溯源性。某校準(zhǔn)物質(zhì)由給定校準(zhǔn)水平的測(cè)量程序定值，應(yīng)同時(shí)評(píng)估測(cè)量不確定度，此不確定度應(yīng)包括所有較高計(jì)量水平的測(cè)量程序和參考標(biāo)準(zhǔn)的不確定度分量總和，即測(cè)量不確定度從上至下逐級(jí)增大，因此溯源過(guò)程應(yīng)盡量減少中間傳遞過(guò)程。測(cè)量不確定度越小，表明實(shí)驗(yàn)室測(cè)量的質(zhì)量和能力越高。邁瑞所有檢測(cè)系統(tǒng)均提供有溯源性、帶有測(cè)量不確定度的配套產(chǎn)品校準(zhǔn)品，用于臨床儀器校準(zhǔn)，其中把測(cè)量不確定度作為靶值的一部分同時(shí)提供給用戶，包括所有較高計(jì)量水平的測(cè)量程序和參考標(biāo)準(zhǔn)的不確定度分量總和。由于對(duì)溯源過(guò)程非常了解，筆者們采用“自下而上”的方法評(píng)定的測(cè)量不確度，全面分析識(shí)別出每一個(gè)可能的測(cè)量不確定度來(lái)源，對(duì)重要的不確定度分量進(jìn)行評(píng)估并合成校準(zhǔn)品的測(cè)量不確定度。為保證臨床結(jié)果準(zhǔn)確性，其測(cè)量不確度要求小于臨床要求的1/3。

5結(jié)束語(yǔ)

制造商在檢測(cè)結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)化中扮演著重要的角色，每個(gè)制造商均建立有效的溯源傳遞，將有助于臨床檢測(cè)結(jié)果互認(rèn)。制造商負(fù)責(zé)提供校準(zhǔn)品和正確度控制品，作為體外診斷檢測(cè)系統(tǒng)的一部分，與儀器、試劑共同使用。邁瑞不僅建立了完善的溯源體系，同時(shí)指導(dǎo)用ERM-DA474/IFHCT參考方法CC制造商選定測(cè)量程序新鮮血工作校準(zhǔn)品血液分析儀標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量程序血液分析儀標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量程序產(chǎn)品校準(zhǔn)品CRP產(chǎn)品校準(zhǔn)品血液分析儀血液分析儀HCT結(jié)果CRP全血質(zhì)量濃度計(jì)算CRP血清質(zhì)量濃度（CRP全血質(zhì)量濃度濃度/HCT）戶端校準(zhǔn)和質(zhì)量控制的應(yīng)用，在檢測(cè)結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)化中履行了自身的職責(zé)。

參考文獻(xiàn)：

［1］Internationalorganizationforstandardization.ISO17511:2020Invitrodiagnosticmedicaldevices—requirementsforestablishingmetrologicaltraceabilityofvaluesassignedtocalibrators，truenesscontrolmaterials，andhumansamples［S］.Geneva:internationalorganizationforstandardization，2020.

［2］Internationalorganizationforstandardization.ISO/IEC17025:2017Generalrequirementsforthecompetenceoftestingandcalibrationlaboratories［S］.Geneva:internationalorganizationforstandardization，2017.

［3］Internationalorganizationforstandardization.ISO15195:2018Laboratorymedicine—requirementsforthecompetenceofcalibrationlaboratoriesusingreferencemeasurementprocedures［S］.Geneva:internationalorganizationforstandardization，2018.

［4］馮仁豐.互換性依然是問(wèn)題［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2013，12（1）：1063-1068.

［5］MILLERWG，BUDDJ，GREENBERGN，etal.Recommendationsforcorrectionofbiascausedbynoncommutabilityofacertifiedreferencematerialusedinthecalibrationhierarchyofanend-usermeasurementprocedure［J］.Clinicalchemistry，2020，66（6）：769-778.

［6］Clinicalandlaboratorystandardsinstitute.CLSIH26-A2validation，verification，andqualityassuranceofautomatedhematologyanalyzers；approvedstandard-secondedition［S］.Wayne，PA:clinicalandlaboratorystandardsinstitute，2010.

［7］BRIGGSC，CULPN，DAVISB，etal.ICSHguidelinesfortheevaluationofbloodcellanalysersincludingthoseusedfordifferentialleucocyteandreticulocytecounting［J］.Internationaljournaloflaboratoryhematology，2014，36：613-627.

作者:楊紅瑋 單位:深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司