時間：2022-04-02 10:25:24
序論：在您撰寫醫(yī)學技術論文時，參考他人的優(yōu)秀作品可以開闊視野，小編為您整理的1篇范文，希望這些建議能夠激發(fā)您的創(chuàng)作熱情，引導您走向新的創(chuàng)作高度。
作者：王忠富，劉宏韜，蔣吉波，楊蕓，吳光輝，鄧沖，曾曉鋒，李楨
隨著我國法制建設的日趨完善和法律知識的不斷普及，每個公民的法制意識也在不斷加強，結(jié)果因死因爭議需完成法醫(yī)學尸檢與鑒定的案件也逐年增多。法醫(yī)工作實踐表明，法醫(yī)病理學技術在死因爭議的法醫(yī)學鑒定中起到了不可低估的作用。本文結(jié)合筆者多年實踐經(jīng)驗，對特殊法醫(yī)病理學技術在死因爭議法醫(yī)學鑒定中所起的作用展開論述。
1 特殊尸體解剖方法在死因爭議案件法醫(yī)學鑒定中的作用
尸體解剖對于死因爭議案件法醫(yī)學鑒定中必須明確的問題具有重要的證明作用。它對查明死因、查明有無潛在性疾病、確定或排除機械性窒息、機械性損傷或毒（藥）中毒等暴力性因素所致死亡有積極的作用。在目前多見的醫(yī)療糾紛案件中，證明或排除醫(yī)方有無診治失誤等問題也是作用重大。特殊尸體檢驗方法有肺動脈栓塞檢驗、空氣栓塞檢驗、氣胸檢驗、小腦扁桃體疝檢驗、肺及胃腸浮揚試驗等，每一種方法都具有其特殊的證明作用。
1.1 空氣栓塞檢驗 常用于懷疑有空氣栓塞因素的致死者。在某些診療過程中，?？梢虿僮鞑簧鞫痨o脈性或動脈性空氣栓塞而危及生命。其中以靜脈性空氣栓塞多見，常見于頸胸部外傷、手術誤傷頸胸部靜脈、人工氣胸或氣腹，腎血管空氣造影、輸卵管通氣術、吸引器人工流產(chǎn)、鼻竇穿刺術等。一般進入血管的空氣量達到60～100 ml以上時即可引起死亡。懷疑靜脈性空氣栓塞死亡的案例，應盡量爭取及早進行尸體檢驗，以免尸體腐敗所產(chǎn)生的腐敗氣體與空氣栓塞相混淆。腦頂部血管內(nèi)空氣泡絕大多數(shù)是因開顱去除顱蓋骨時從矢狀線撕去硬腦膜后致空氣進入腦血管，不應該為空氣栓塞。
1.2 氣胸檢驗 當懷疑死者有肋骨骨折的斷端刺破肺膜和肺組織、或有大泡性肺氣腫及肺膿腫破裂者，或者在頸胸部及上腹部進行過穿刺治療者，需檢查有無氣胸的存在，為判斷是否氣胸所致死亡提供證據(jù)。檢查方法是在開顱、開胸及解剖頸項部之前，先在胸部正中做一縱形切口，將皮下組織剝離至兩側(cè)腋中線處，提起使其形成袋狀，盛水后用力在水面之下刺破肋間隙。若有水泡冒出水面，即可證實氣胸的存在。應該注意的是，剝離胸壁軟組織時不可將肋間隙剝破，以免空氣經(jīng)破裂處進入胸腔造成假陽性結(jié)果。
1.3 小腦扁桃體疝檢驗 對死于顱腦損傷以及懷疑各種腦病的死者，有必要做小腦扁桃體疝檢驗，因為當存在顱腦損傷或病理性出血如腫瘤、腦及腦膜炎癥等情況下，都會引起顱內(nèi)壓增高，嚴重者便可導致小腦扁桃體疝的形成。檢查有無小腦扁桃體疝的存在，可以供死因分析時參考。檢查方法是取尸體仰臥位并墊高頸部，從枕骨粗隆下開始沿頸后部正中線切開枕頸部頭皮，深達骨膜。自切口兩側(cè)分離軟組織，用咬骨鉗咬斷寰椎弓并剪開硬腦膜，暴露枕骨大孔內(nèi)的延腦和頸髓，觀察有無小腦扁桃體疝及其程度?？勺责尴路角袛囝i髓及兩側(cè)神經(jīng)，待開顱后將上段頸髓連同腦組織一并取出。雖然開顱取出腦后也可以觀察有無小腦扁桃體疝的形成，但本方法更有助于原位觀察。
1.4 肺及胃腸浮揚試驗 多用于產(chǎn)科醫(yī)療糾紛之中，因為此時常有新生兒是活產(chǎn)還是死產(chǎn)之爭。該方法系判斷新生兒是活產(chǎn)還是死產(chǎn)的重要標志，主要根據(jù)新生兒出生后是否進行過呼吸，最常用的方法是肺及胃腸浮揚試驗。未經(jīng)過呼吸的肺，因肺內(nèi)不含空氣而呈實體狀，比重為1.045～1.056，投入冷水中即下沉，而出生后隨著呼吸運動的建立，全部肺泡被空氣脹滿，肺的體積膨脹，比重＜1，投入冷水中不下沉而是浮于水面。胃腸浮揚試驗是肺浮揚試驗的輔助試驗，由于新生兒呼吸運動時，也將部分氣體咽入胃內(nèi)，并隨時間推移而逐漸進入十二指腸及小腸。依次結(jié)扎賁門、幽門、十二指腸上下端、空腸、回腸及結(jié)腸，將胃腸全部取出投入冷水中，觀察浮沉情況。如果尸體已經(jīng)腐敗，肺及胃腸浮揚試驗則無意義。
2 病理組織學特殊染色方法在死因爭議案件法醫(yī)學鑒定中的作用
有死因爭議的尸體經(jīng)過尸體解剖檢驗后，只有部分案例通過肉眼檢查即可作出初步診斷，而大多數(shù)案件必須經(jīng)過病理組織學檢驗，才能進一步查明死因，確定或排除某些病變的存在，并明確病變與死亡的因果關系或死亡與治療的因果關系等。
常用的病理組織學方法包括常規(guī)組織學染色方法（H-E法）、脂肪染色法、羊水角化鱗狀上皮細胞染色及纖維組織染色法等。各方法具有其特殊的診斷目的，現(xiàn)舉例如下。
2.1 常規(guī)組織學染色法（H-E法） 常規(guī)組織學染色法是尸體解剖后將各內(nèi)臟器組織取材、固定、包埋、切片、染色、封片等處理后，再觀察組織的細微病理變化，以進一步診斷疾病，明確死因。
2.2 常用的特殊染色方法
2.2.1 脂肪染色法 一般情況下，不必特別證明脂肪細胞或脂質(zhì)的存在，但對疑為脂肪栓塞而死亡者，如燒死尸體、全身軟組織大面積挫傷、長骨骨折或做過骨科手術、乳腺切除、油劑注射者、部分交通事故意外損傷死亡案例，都有必要做脂肪染色，以證明脂肪栓子的存在。此外，常規(guī)H-E染色鏡檢見組織內(nèi)有較多空泡而懷疑有空氣栓塞時，也必須做脂肪染色，以鑒別診斷。某些毒物中毒如砷化物、磷化鋅中毒時，往往導致心肌細胞濁腫及脂肪變性，心肌細胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)多數(shù)細小的脂肪滴，也需要做脂肪染色來證明。常用的染色方法有：蘇丹Ⅲ（Ⅳ）法、蘇丹黑法等。由于脂肪易溶于酒精等有機溶劑，常常在取出組織后，先用10%的福爾馬林固定，然后冰凍切片。
2.2.2 羊水角化鱗狀上皮染色法 產(chǎn)婦分娩過程中若有子宮肌壁的破裂，子宮收縮時可將羊水壓入破裂的子宮壁靜脈竇內(nèi)，羊水成分可以由子宮靜脈進入肺循環(huán)，在肺動脈小分支或毛細血管內(nèi)引起羊水栓塞。少量羊水成分還可以通過肺毛細血管進入大循環(huán)而引起多數(shù)器官小血管栓塞。羊膜產(chǎn)生的羊水中含有脫落的角化鱗狀上皮。在H-E染色中呈淡紅色，對比不清晰。特別是當上皮較少時必須通過特殊染色，才利于證明它的存在。常用的方法有：角蛋白染色、黏多糖染色、彈性蛋白染色；酸性復紅-馬修黃對比染色；阿爾卑藍-熒光桃紅染色法等。
2.2.3 纖維染色法 有膠原纖維、彈力纖維和網(wǎng)狀纖維染色法，各用于不同的情況下。
膠原纖維在H-E染色中不易與其他纖維相區(qū)別，必須用特殊的染色方法來加以區(qū)分。該方法可用于檢查心肌瘢痕組織灶、早期肝硬化等。彈力纖維染色用于支氣管擴張、老年性肺氣腫、高血壓細動脈壁纖維增厚，冠狀動脈粥樣硬化彈力纖維的崩解、斷裂與消失等。常用的方法有Oreein地衣紅法、Verhoff彈性纖維染色法等。網(wǎng)狀纖維染色法主要用于區(qū)別腦膜瘤與星形細胞瘤，以及用于判斷肝組織網(wǎng)狀支架塌陷破壞或增生等情況。常用的染色方法有：Gomori銀染色法、Masson三色法及Mallory三色法等。
3 總結(jié)
死亡原因的確定，往往是解決死因爭議案件的關鍵所在，也是法醫(yī)學鑒定的主要任務。以上列舉的僅是法醫(yī)病理學鑒定中的部分檢驗技術與方法。在死因爭議案件中，在完成這些技術方法的同時應結(jié)合案情調(diào)查、現(xiàn)場勘察、死亡情況、尸體檢驗、毒物檢驗及其他實驗室檢查等，綜合得出結(jié)論。醫(yī)療糾紛案例還應聘請臨床醫(yī)學專家進行會診，以確保法醫(yī)學鑒定水平和質(zhì)量。
摘 要 納米技術與生物化學、分子生物學整合將對21世紀的生物醫(yī)學產(chǎn)生深刻的影響。它將利用生物大分子進行物質(zhì)的組裝、分析與檢測技術的優(yōu)化、并將藥物靶向性與基因治療等研究引入微型、微觀領域，用納米生物技術檢測是否患有癌癥只用幾個細胞。
關鍵詞 納米技術；納米生物學；DNA納米技術
20世紀80年代才開始研究的納米技術在90年代獲得了突破性進展。最近美國《商業(yè)周刊》列出了21世紀可能取得重大突破的三個領域：一是生命科學和生物技術；二是從外星球獲取能源；三是納米技術。所謂納米技術(Nanotechnology)是指在小于100 nm的量度范圍內(nèi)對物質(zhì)和結(jié)構(gòu)進行制造的技術，其實就是一種用單個原子、分子制造物質(zhì)的科學技術［1］。納米技術在新世紀將推動信息技術、生物醫(yī)學、環(huán)境科學、自動化技術及能源科學的發(fā)展，將極大的影響人類的生活，衣、食、住、行、醫(yī)療等方面。本文將圍繞納米技術給21世紀的生物醫(yī)學可能帶來影響作一概述。
1 納米生物學的研究對象
有人把在納米尺度(水平)上研究生命現(xiàn)象的生物學叫做納米生物學。納米結(jié)構(gòu)通常指尺寸在1 nm～100 nm范圍的微小結(jié)構(gòu)。1納米等于10-9m，即1m的十億分之一。我們知道，細胞具有微米(10-6m)量級的空間尺度，生物大分子具有納米量級的空間尺度。在它們之間的層次是亞細胞結(jié)構(gòu)，具有幾十到幾百納米量級的空間尺度。顯然在納米水平上研究生命現(xiàn)象的納米生物學，它的研究對象就是亞細胞結(jié)構(gòu)和生物大分子體系。由于納米微粒的尺寸一般比生物體內(nèi)的細胞、紅細胞小得多，這就為生物學研究提供了一個新的研究途徑即利用納米微粒進行細胞分離、疾病診斷，利用納米微粒制成特殊藥物或新型抗體進行局部定向治療等。
2 納米技術在生物醫(yī)學方面的應用
2.1 測量和控制生物大分子
納米技術與掃描探針顯微鏡(Scanning probe microscopes,SPMs)相結(jié)合，便具有了觀察、制造原子水平物質(zhì)結(jié)構(gòu)的能力，為生物醫(yī)學工作者提供了直接在亞細胞水平或分子水平研究生命現(xiàn)象的應用前景［2，3］。掃描探針顯微鏡是指利用掃描探針的顯微技術，常用的有掃描隧道顯微鏡(STM,它是Scanning Tunneling Microscope的簡稱)和 原子力顯微鏡(AFM,它是Atomic Force Microscope的簡稱)。STM的原理是利用電子隧道效應測量探針和樣品間微小的距離，又將探針沿樣品表面逐點掃描，從而得到樣品表面各點高低起伏的形貌。當探針和樣品表面間的距離非常近達到一個納米時，同時在它們之間施加適當電壓，在它們之間會形成隧道電流，這就是電子隧道效應。這時探針尖端便吸引材料的一個原子過來，然后將探針移至預定位置，去除電壓，使原子從探針上脫落。如此反復進行，最后便按設計要求“堆砌”出各種微型構(gòu)件。
Hafner(1999)等［4］報道了碳納米管的制備方法，整個過程如同用磚頭蓋房子一樣。隧道電流的大小和探針與表面間的距離有關，因此通過隧道電流的測量可以確定這距離的值。STM觀測的樣品要有導電性，用AFM就沒有這種要求。AFM的原理是用探針的針尖去“觸摸”樣品表面，將探針沿表面逐點掃描，針尖隨著樣品表面的高低起伏作上下運動。用光學方法精確測量針尖這種上下運動，就可以得到樣品表面高低起伏的圖像。用AFM還可以測量分子間作用力的大小以及不同環(huán)境中分子間作用力大小的變化。掃描探針顯微鏡又是操作生物大分子的工具。用它們可以扭轉(zhuǎn)或拉伸生物大分子，從而研究單個生物大分子的運動學特性。STM和AFM在平行于樣品表面的方向上的空間分辨率達到0.1 nm。已知樣品中原子間距離的量級是0.1 nm ，所以STM和AFM的空間分辨率達到了分辨單個原子的水平。它的時間分辨率取決于要掃描的樣品范圍和像素點數(shù)目，用它們測量固定觀測點時，時間分辨率達到ns甚至ps，掃描一幅面積是10 nm×10 nm的樣品時，中等象素密度的時間分辨率約是1秒［5］。顯而易見，利用STM、AFM等技術，好象使用“納米筆”一樣，可以操縱原子分子，在納米石版印刷術中構(gòu)造復雜的圖形和結(jié)構(gòu)［6］。
2.2 磁性納米粒子的應用
德國學者報道了含有75%～80%鐵氧化物的超順磁多糖納米粒子(200～400 nm)的合成和物理化學性質(zhì)［7］。將它與納米尺寸的SiO2相互作用，提高了顆?；w的強度，并進行了納米磁性顆粒在分子生物學中的應用研究。試驗了具有一定比表面的葡聚糖和二氧化硅增強的納米粒子。在下列方面與工業(yè)上可獲得的人造磁珠作了比較：DNA自動提純、蛋白質(zhì)檢測、分離和提純、生物物料中逆轉(zhuǎn)錄病毒檢測、內(nèi)毒素清除和磁性細胞分離等。例如在DNA自動提純中，用濃度為25 mg/mL的葡聚糖 nanomag R和SiO2增強的納米粒子懸濁液，達到了≥300 ng/ μL的DNA型1～2 KD的非專門DNA鍵合能力。SiO2增強的葡聚糖納米粒子的應用使背景信號大大減弱。此外，還可以將磁性納米粒子表面涂覆高分子材料后與蛋白質(zhì)結(jié)合，作為藥物載體注入到人體內(nèi)，在外加磁場2125×103/π(A/m)作用下，通過納米磁性粒子的磁性導向性，使其向病變部位移動，從而達到定向治療的目的。例如10～50 nm的Fe3O4的磁性粒子表面包裹甲基丙烯酸，尺寸約為200 nm，這種亞微米級的粒子攜帶蛋白、抗體和藥物可以用于癌癥的診斷和治療。這種局部治療效果好，副作用少。
2.3 納米脂質(zhì)體—仿生物細胞的藥物載體
脂質(zhì)體（Liposome)是一種定時定向藥物載體，屬于靶向給藥系統(tǒng)的一種新劑型。20世紀60年代，英國Bangham AD首先發(fā)現(xiàn)磷脂分散在水中構(gòu)成由脂質(zhì)雙分子層組成的內(nèi)部為水相的封閉囊泡，由雙分子磷脂類化合物懸浮在水中形成的具有類似生物膜結(jié)構(gòu)和通透性的雙分子囊泡稱為脂質(zhì)體。70年代初，Rahman YE等在生物膜研究的基礎上，首次將脂質(zhì)體作為酶和某些藥物的載體。納米脂質(zhì)體作為藥物載體的優(yōu)點：①由磷脂雙分子層包封水相囊泡構(gòu)成，與各種固態(tài)微球藥物載體相區(qū)別，脂質(zhì)體彈性大，生物相容性好；②對所載藥物有廣泛的適應性，水溶性藥物載入內(nèi)水相，脂溶性藥物溶于脂膜內(nèi)，兩親性藥物可插于脂膜上，而且同一個脂質(zhì)體中可以同時包載親水和疏水性藥物；③磷脂本身是細胞膜成分，因此納米脂質(zhì)體注入體內(nèi)無毒，生物利用度高，不引起免疫反應；④保護所載藥物，防止體液對藥物的稀釋，及被體內(nèi)酶的分解破壞。納米粒子將使藥物在人體內(nèi)的傳輸更為方便。對脂質(zhì)體表面進行修飾，譬如將對特定細胞具有選擇性或親和性的各種配體組裝于脂質(zhì)體表面，以達到尋靶目的。以肝臟為例，納米粒子—藥物復合物可通過被動和主動兩種方式達到靶向作用：當該復合物被Kupffer細胞捕捉吞噬，使藥物在肝臟內(nèi)聚集，然后再逐步降解釋放入血液循環(huán)，使肝臟藥物濃度增加，對其它臟器的副作用減少，此為被動靶向作用；當納米粒子尺寸足夠小約100～150 nm且表面覆以特殊包被后，便可以逃過Kupffer細胞的吞噬，靠其連接的單克隆抗體等物質(zhì)定位于肝實質(zhì)細胞發(fā)揮作用，此為主動靶向作用。用數(shù)層納米粒子包裹的智能藥物進入人體后可主動搜索并攻擊癌細胞或修補損傷組織。
納米粒作為輸送多肽與蛋白質(zhì)類藥物的載體是令人鼓舞的，這不僅是因為納米?？筛倪M多肽類藥物的藥代動力學參數(shù)，而且在一定程度上可以有效地促進肽類藥物穿透生物屏障。納米粒給藥系統(tǒng)作為多肽與蛋白質(zhì)類藥物發(fā)展的工具有著十分廣泛的應用前景［8］。
2.4 DNA納米技術和基因治療
DNA納米技術(DNA nanotechnology)是指以DNA的理化特性為原理設計的納米技術，主要應用于分子的組裝。DNA復制過程中所體現(xiàn)的堿基的單純性、互補法則的恒定性和專一性、遺傳信息的多樣性以及構(gòu)象上的特殊性和拓撲靶向性，都是納米技術所需要的設計原理［9］?，F(xiàn)在利用生物大分子已經(jīng)可以實現(xiàn)納米顆粒的自組裝。將一段單鏈的DN斷連接在13 nm直徑的納米金顆粒A表面，再把序列互補的另一種單鏈DN斷連接在納米金顆粒B表面，將A和B混合，在DNA雜交條件下，A和B將自動連接在一起［10］。利用DNA雙鏈的互補特性，可以實現(xiàn)納米顆粒的自組裝。利用生物大分子進行自組裝，有一個顯著的優(yōu)點：可以提供高度特異性結(jié)合，這在構(gòu)造復雜體系的自組裝方面是必需的。
美國波士頓大學生物醫(yī)學工程所Bukanov等研制的PD環(huán)(PD?loop)(在雙鏈線性DNA中復合嵌入一段寡義核苷酸序列)比PCR擴增技術具有更大的優(yōu)越性；其引物無須保存于原封不動的生物活性狀態(tài)，其產(chǎn)物具有高度序列特異性，不像PCR產(chǎn)物那樣可能發(fā)生錯配現(xiàn)象。PD環(huán)的誕生為線性DNA寡義核苷酸雜交技術開辟了一條嶄新的道路，使從復雜DNA混合物中選擇分離出特殊DN段成為可能，并可能應用于DNA納米技術中［11］。
基因治療是治療學的巨大進步，質(zhì)粒DNA插入目的細胞后，可修復遺傳錯誤或可產(chǎn)生治療因子(如多肽、蛋白質(zhì)、抗原等)。利用納米技術，可使DNA通過主動靶向作用定位于細胞；將質(zhì)粒DNA濃縮至50～200 nm大小且?guī)县撾姾?，有助于其對細胞核的有效入侵；而最后質(zhì)粒DNA插入細胞核DNA的準確位點則取決于納米粒子的大小和結(jié)構(gòu)。此時的納米粒子是DNA本身所組成，但有關它的物理化學特性尚有待進一步研究［12］。
2.5 納米細胞分離技術
20世紀80年代初，人們開始利用納米微粒進行細胞分離，建立了用納米SiO2微粒實現(xiàn)細胞分離的新技術。其基本原理和過程是：先制備SiO2納米微粒，尺寸大小控制在15～20 nm,結(jié)構(gòu)一般為非晶態(tài)，再將其表面包覆單分子層。包覆層的選擇主要依據(jù)所要分離的細胞種類而定，一般選擇與所要分離細胞有親和作用的物質(zhì)作為附著層。這種SiO2納米粒子包覆后所形成復合體的尺寸約為30 nm。第二步是制取含有多種細胞的聚乙烯吡咯烷酮膠體溶液，適當控制膠體溶液濃度。第三步是將納米SiO2包覆粒子均勻分散到含有多種細胞的聚乙烯吡咯烷酮膠體溶液中，再通過離心技術，利用密度梯度原理，使所需要的細胞很快分離出來。此方法的優(yōu)點是：①易形成密度梯度；②易實現(xiàn)納米SiO2粒子與細胞的分離。這是因為納米SiO2微粒是屬于無機玻璃的范疇，性能穩(wěn)定，一般不與膠體溶液和生物溶液反應，既不會沾污生物細胞，也容易把它們分開。
3 發(fā)展趨勢
跨入21世紀后的未來二三十年，數(shù)學、化學、物理學等基礎研究的進展將擴大納米技術的應用范圍，使納米技術與物醫(yī)學的聯(lián)系更加緊密，其發(fā)展趨勢是：①生體相容性好的鈦合金等物質(zhì)將逐步開發(fā)［13］，并進入臨床試驗階段；②納米技術與分子生物學技術相結(jié)合，將有助于揭示生物大分子各級結(jié)構(gòu)與功能的破譯；③納米生物技術將使藥物的生產(chǎn)實現(xiàn)低成本、高效率、自動化、大規(guī)模，而藥物的作用將實現(xiàn)器官靶向化［14］； ④納米生物技術應用于分子之間的相互作用、分子復合物和分子組裝的研究將在病毒結(jié)構(gòu)、細胞器結(jié)構(gòu)細節(jié)和自身裝配機制上取得進展［15］；⑤納米生物技術將使生物活性分子診斷、檢測技術向微型、微觀、微量、微創(chuàng)或無創(chuàng)、快速、實時、遙距、動態(tài)、功能性和智能化的方向發(fā)展。
有人預測，二三十年后，醫(yī)生使用納米技術只需檢測幾個細胞就能判斷出病人是否患上癌癥或判斷胎兒是否有遺傳缺陷。婦女懷孕8個星期左右，在血液中開始出現(xiàn)非常少量的胎兒細胞，用納米微粒很容易將這些胎兒細胞分離出來進行診斷。在人工器官外面涂上納米粒子可預防移植后的排異反應。使用納米技術的新型診斷儀器只需檢測少量血液，就能通過其中的蛋白質(zhì)和DNA診斷出各種疾病。
關鍵詞：醫(yī)學教育；網(wǎng)絡；計算機
因特網(wǎng)作為一個無國界的計算機通信網(wǎng)絡已經(jīng)滲透入我們生活的方方面面，已對醫(yī)學教學和科研產(chǎn)生十分重要的影響。計算機網(wǎng)絡和數(shù)字技術正在改變高等醫(yī)學院校的辦學模式和教育理念，醫(yī)學教育正在逐步跨入信息化時代?，F(xiàn)將幾年來我科應用因特網(wǎng)進行教學的體會介紹如下。
1 因特網(wǎng)的基本特點
國際互聯(lián)網(wǎng)是目前世界上覆蓋面最廣、信息資源最豐富、規(guī)模最大的計算機網(wǎng)絡。因特網(wǎng)的雛形是由美國國防部資助建設的名為ARPANET的網(wǎng)絡，由于采用了TCP／IP協(xié)議，并用公開了TCP／IP協(xié)議的核心技術，使得因特網(wǎng)得到了迅猛發(fā)展。因特網(wǎng)具有開放、自由、交互性強的特點，所以其具有信息資源豐富、入網(wǎng)方式多樣、信息服務靈活以及多種信息技術相融合的優(yōu)點，被廣泛應用到教育、行政、企業(yè)等各行各業(yè)之中，是世界各國“信息高速公路”計劃的重要基礎設施。
2 網(wǎng)絡軟件的應用
2.1 網(wǎng)頁制作軟件
常用軟件有Macromedia Dreamweaver、Microsoft Front-page、網(wǎng)頁作坊等等。通過這些軟件使得網(wǎng)頁制作簡單易行，我們用教學素材制作出精美的網(wǎng)頁．在網(wǎng)頁中可以添加文字、聲音、圖片、視頻、動畫，使其圖文并茂、形象生動、動感十足，極大提高學生的學習興趣。制作好的網(wǎng)頁既可以用于多媒體教學，又可以上傳至互聯(lián)網(wǎng)便于學生進行自學。
2.2 電子書制作軟件
常用軟件有Adobe Acrobat、Quick CHM、E書伴侶、電子文檔處理器、e書工場等等。通過把教學素材制作成不同的電子書，便于打包攜帶及檢索。并可以在不同的載體上閱讀，方便學生學習，大大提高學習效率。例如利用電子文檔處理器制作出藥典讓學生下載到掌上電腦、電子書閱讀器、MP3等載體，使學生能夠隨身攜帶、快速查閱，并從機械的記憶中解脫出來。
2.3 動畫制作軟件
常用軟件有Flash MX、Authorware等。利用這些軟件與網(wǎng)頁制作軟件相結(jié)合，使網(wǎng)頁內(nèi)容更加豐富多彩；亦可制作生動的教學動畫，使教學擺脫枯燥無味的格調(diào)，寓教于樂，加深學生的印象，學生易于掌握。如利用Flash MX是交互式矢量圖和Web動畫的標準，心血管系統(tǒng)血液循環(huán)的動畫、細胞周期動畫使學生對教學內(nèi)容一目了然。
3 網(wǎng)絡搜索引擎的應用
搜索引擎是一個對互聯(lián)網(wǎng)上的信息資源進行收集整理，然后供查詢的系統(tǒng)，它包括信息收集、信息整理和用戶查詢?nèi)糠?，是一個為人們提供信息“檢索”服務的網(wǎng)站，它使用某些程序把因特網(wǎng)上的所有信息歸類以幫助人們在茫茫網(wǎng)海中搜尋到所需要的信息。通過關鍵詞及一些必要的技巧，我們很容易在互聯(lián)網(wǎng)上找到自己所需要的信息，極大地方便了醫(yī)學教學。
目前比較有名的醫(yī)學專業(yè)搜索引擎有Medical Matrix，HeahhWeb，HealthAtoZ，Medscape，Medical World Search等。這些搜索引擎提供了關鍵詞搜索和分類目錄搜索，利用它們可以免費進入因特網(wǎng)臨床醫(yī)學數(shù)據(jù)庫，查閱到許多醫(yī)學資料，擴大醫(yī)學生的知識面，同時也豐富了教師的教學資料，使教學活動達到事半功倍之功效。其他非醫(yī)學搜索引擎還有Google、Yahoo、百度、新浪等，利用它們我們同樣可以查到許多有用的資料。例如：以“SARS”作為關鍵詞用百度引擎搜索，在0.001s內(nèi)即可找到相關網(wǎng)頁約2600000篇；再以“防治”作為關鍵詞進一步搜索，許多SARS防治的相關資料立刻呈現(xiàn)在眼前，使我們在極短的時間內(nèi)便獲得了許多新知識，提高學習效率。
4 BBS論壇的應用
BBS是Bulletin Board System的英文縮寫，即電子公告牌系統(tǒng)，它通過在服務器上運行服務軟件，允許用戶使用終端程序通過網(wǎng)絡來進行連接，執(zhí)行下載數(shù)據(jù)(或程序)、上傳數(shù)據(jù)、閱讀新聞、交換消息等功能。BBS已經(jīng)日益普及，功能得到了很大的擴充。通過BBS系統(tǒng)可隨時取得國際最新的專業(yè)信息，也可以通過BBS系統(tǒng)來和別人討論方方面面的話題，更可以利用BBS系統(tǒng)來刊登一些“征文”、“求助”及“提問”等啟事，極大方便了學生之間、師生之間以及教師之間的交流。我們利用BBS來組織疑難病例討論、通知、布置作業(yè)、組織英語沙龍及各種愛好者協(xié)會等多種教學活動，得到了學生的積極響應，網(wǎng)絡的點擊率大大提高。既調(diào)動了學生的學習積極性，也提高了工作效率。
5 遠程教學系統(tǒng)的應用
遠程教學是指學的過程和教的過程不在同一時間或同一地點下進行的教學，但使整個或部分學習過程得到了教師的計劃、導引、輔導和評估。參加遠程教學的學生只需在家里登錄相應的網(wǎng)站，就可以享受到多種形式的教學，還可以提供網(wǎng)上交流和討論。
5.1 在函授教育中的應用
學校通過網(wǎng)絡招生信息，學生通過網(wǎng)上報名，教師將教學信息傳遞給學生，學生通過聯(lián)網(wǎng)的計算機接收信息進行學習，在學習的過程中，還可以通過計算機網(wǎng)絡與教師和同學進行各種形式的交流。也可以在網(wǎng)上考試的日程表，在網(wǎng)絡上完成考試，而考試分數(shù)則會以E-mail和信件的形式通知學生。這樣既方便學生，也方便教師，同時還可以節(jié)約教學成本，非常適合中國國情。
5.2 在繼續(xù)教育中的應用
我校與多個醫(yī)學專業(yè)網(wǎng)站(如好醫(yī)生網(wǎng)站)合作，利用其網(wǎng)站資源對全校教師進行繼續(xù)教育培訓。要求每位教師自由上網(wǎng)，選擇本專業(yè)教育課程進行學習，每年獲取一定的學分作為繼續(xù)教育培訓的依據(jù)。
5.3 在對外交流中的應用
通過遠程教學系統(tǒng)，我們隨時可以和區(qū)內(nèi)外，甚至國內(nèi)外同行進行交流，定期組織學生、教師遠程學術活動，使他們能及時了解國內(nèi)外專業(yè)領域的最新動態(tài)。
6 展望
因特網(wǎng)在醫(yī)學中的實踐，促進了醫(yī)學教學改革和發(fā)展，為醫(yī)學各學科開辟了教育的新途徑，同時也對醫(yī)學教育工作者提出了全新的研究課題。如何在網(wǎng)絡環(huán)境下進行有效的教學管理和學習引導，如何更好的應用現(xiàn)代教學手段深入進行教學改革、培養(yǎng)高素質(zhì)醫(yī)學人才已經(jīng)成為時代對我們的要求。充分發(fā)揮這一新技術、新事物的優(yōu)勢，必將為我國醫(yī)學教育事業(yè)的發(fā)展和建設作出更大的貢獻。
論文關鍵詞:就業(yè) 項目化教學 口腔工藝技術
論文摘要:通過深人調(diào)研、分析就業(yè)市場對口腔醫(yī)學技術人才崗位及核心能力實際需求的基礎上，在口腔工藝技術專業(yè)教學中，開展就業(yè)導向下的項目化教學，探討就業(yè)導向下的口腔醫(yī)學技術專業(yè)項目化教學方法實施的效果，從而提高學生的職業(yè)技能和就業(yè)能力。
目前，高校畢業(yè)生就業(yè)難已為社會各界廣泛關注的問題，如何提高高校學生的就業(yè)質(zhì)量和就業(yè)率，成為各高等學校進行教學改革的主要目標。然而，隨著科技進步和社會發(fā)展，職業(yè)學校傳統(tǒng)教學模式下培養(yǎng)出的人才不能較好地適應就業(yè)市場的弊端日益顯現(xiàn)。于是，一種針對當前就業(yè)市場的人才需求、有效縮短畢業(yè)生的就業(yè)適應期、注重培養(yǎng)學生職業(yè)能力的教學模式—項目化教學，應運而生。
口腔工藝技術專業(yè)是一門技術性很強的應用性學科，在多年從事專業(yè)教學的實踐過程中，通過對用人單位崗位技能需求深人實地的考察調(diào)研以及對畢業(yè)生就業(yè)情況的追蹤分析，深感現(xiàn)有的專業(yè)教學模式和學生在校獲取的專業(yè)技能與用人單位的崗位需求嚴重脫節(jié)，學生在企業(yè)只需幾個月就能熟練掌握的技能，在校學習了2-3年后竟然不會，學生的職業(yè)能力水平不高導致就業(yè)競爭力低下。自2006年起，在口腔工藝技術專業(yè)教學中，開展就業(yè)導向下的項目化教學，有效地提高了學生的職業(yè)技能和就業(yè)能力，為畢業(yè)生就業(yè)、創(chuàng)業(yè)奠定了良好的基礎，現(xiàn)總結(jié)回顧如下:
1項目化教學的內(nèi)涵與意義
項目化教學是一種以就業(yè)為導向，以工作任務為中心，選擇、組織并學習工作知識的教學模式，是“行為導向法”的一種，也是當前我國職教課程改革的主要方向，其理論基礎是職業(yè)教育課程的結(jié)構(gòu)觀。項目化教學，改變過去傳統(tǒng)教學中以教師為中心，以理論講解為中心的“滿堂灌”教學模式，強調(diào)教師的“講”和學生的“練”有機地結(jié)合起來，以任務為中心，通過對教學目標項目的分解、實踐達到預期的教學目標，切實提高高職學生的專業(yè)技能和實際操作能力。
2項目化教學的特點
2.1“項目”是市場人才需求與課程教學內(nèi)容雙向融合的結(jié)晶
以專業(yè)人才就業(yè)市場需求為依據(jù)，以所學課程教學內(nèi)容為基礎，是項目設計的基本原則。只有這樣，才能讓學生在開發(fā)項目的過程中，完成特定崗位的知識群和技能群的意義建構(gòu)，為學生就業(yè)打下堅實基礎。
2.2項目的完成有賴于全體成員的合理分工和通力協(xié)作
項目化教學一般以“開發(fā)小組”為單位，依據(jù)項目目標各小組獨立地組織、安排本組的“實踐活動”，“實踐過程”中全體成員按照分工相對獨立地開展工作，同時又要與其他成員保持聯(lián)系，通過交流和協(xié)商，共同完成小組的項目任務，這樣有利于培養(yǎng)學生的自主學習能力和交流協(xié)作的團隊精神。
3項目化教學的實施過程
3.1分析教學內(nèi)容，確定項目任務
確立實用、優(yōu)秀的項目是項目教學法實施成功與否的關鍵所在。項目教學的教學過程重點在于師生協(xié)同努力完成一個具有實際意義的項目的開發(fā)，所選項目應緊扣教學大綱和教學目標，在設計項目時，要以教學大綱為指導，力求使大綱中的知識點融合到各個項目中去，學生通過操作項目后，可以概括性地了解所學職業(yè)的主要工作內(nèi)容以及勝任這些工作應具備的基本技能。同時，項目應具有一定的實用性、針對性?？谇会t(yī)學技術是一門技術性很強的應用性學科，項目的設計應以就業(yè)為導向，以實際工作崗位需求為依據(jù)，在深人行業(yè)充分調(diào)研的基礎上，邀請行業(yè)一線專家共同確定項目任務，實現(xiàn)專業(yè)教學與工作崗位的零距離接軌。
3.2項目實施階段
第一步是對所教班級的學生進行分組—建立合作學習小組。教師根據(jù)每個學生各方面不同的特點，如年齡、性別、個性、學習成績等，把能力參差不齊的學生安排在一個小組，促使來自不同個性、不同特點的學生在合作學習中建立相互信任、了解和欣賞。第二步是按計劃完成項目。這一階段以學生的自學和相互協(xié)作為主，教師鼓勵學生大膽去嘗試，此時學生應明確自己的角色，并站在角色的角度去觀察思考，去分析決策，體驗工作的艱辛，激發(fā)個人潛能和創(chuàng)新能力。
3.3項目成果的提交與評價
當整個項目實施結(jié)束后要進行總評，總評應體現(xiàn)公平、公正、公開的原則，應采取學生自評，互評和教師總評的方式。評價還應結(jié)合不同項目的特點，從“知識與技能”、“過程與方法”、“情感態(tài)度和價值觀”三個方面，將項目評價和學生個人評價有機結(jié)合。評價的目的不應只評出分數(shù)和名次，更應指出問題所在，并給出具體改進及修改建議，讓學生在下一個項目學習中表現(xiàn)更出色。
4項目化教學應用體會
4.1項目化教學真正體現(xiàn)教學中“以學生為主”的理念
教學改革的核心內(nèi)容就是激發(fā)學生的學習熱情，變被動學習為主動學習。從教學目標來看，項目化教學是應用已有的知識進行學習和技能提高，而傳統(tǒng)教學則是教師向?qū)W生傳授知識和技能;從教學形式上來看，項目教學是學生在老師的指導下主動學習，而傳統(tǒng)教學則是以教師教為主，學生被動學習;從學生的參與程度來看，項目化教學是學生根據(jù)自己的興趣來作出選擇，體現(xiàn)了“我要學”，而傳統(tǒng)教學是學生聽從教師的指揮，是“要我學”的被動學習;從師生互動的方面考慮，項目教學表現(xiàn)出學生主動提問問題，教師為學生解答問題的學習互動形式，傳統(tǒng)教學則是教師提問學生回答，主動權在教師一方;從教學動力方面來看，項目化教學是教師圍繞學生的優(yōu)點開展教學活動，學生的內(nèi)在動力得以調(diào)動，能維持長久，而傳統(tǒng)教學中教師要尋找學生的不足來進行教學，主要靠外在動力強迫學生學習，效果自然不佳。
4.2項目化教學更有利于高職教學培養(yǎng)目標的實現(xiàn)
高職教育的培養(yǎng)目標，就是培養(yǎng)與我國社會主義現(xiàn)代化建設要求相適應的，掌握本專業(yè)必備的基礎理論和專門知識，具有從事本專業(yè)實際工作的全面素質(zhì)和綜合職業(yè)能力的技術應用型人才。這一培養(yǎng)目標要求我們在高職教學過程中，要注重學生職業(yè)技能的培養(yǎng)。項目化教學有力地體現(xiàn)了高職教育培養(yǎng)目標對高職教學的要求。所以，完成項目的過程，就是對知識綜合運用的過程，就是一個學習的過程，也是一個自主探索創(chuàng)新的過程。項目給學生提供了根據(jù)自己的興趣選擇內(nèi)容和展示能力的機會，學生能夠自主、自由地進行學習，從而有效地促進學生創(chuàng)造能力的發(fā)展。
綜上所述，項目化教學突破了傳統(tǒng)的教學模式，通過解決一些現(xiàn)實問題來實現(xiàn)學生對知識的掌握，大大提高了學生學習的積極性、主動性和實際工作能力，有效地促進了學生創(chuàng)造能力的發(fā)展，充分體現(xiàn)了以就業(yè)為導向，以能力為本位，以促進學生全面發(fā)展為中心的教育思想，真正實現(xiàn)了專業(yè)教學與實際工作崗位的有效接軌，為畢業(yè)生就業(yè)、創(chuàng)業(yè)奠定了良好的基礎。實踐證明，這種教學模式是可取的、有實際價值的。
[論文摘要]《普通高職高專專業(yè)目錄》調(diào)整了原來的醫(yī)藥衛(wèi)生類高職高專的招生專業(yè)，由醫(yī)學高職高專院校原來可以開辦的相關醫(yī)學類的專業(yè)調(diào)整為只能開辦醫(yī)學技術類專業(yè)，培養(yǎng)的目標是高級應用技術人才，這使高職高專醫(yī)學影像技術專業(yè)面臨新的挑戰(zhàn)。為了更好地應對這一挑戰(zhàn)，醫(yī)學影像技術專業(yè)必須對現(xiàn)有的課程設置進行調(diào)整，以培養(yǎng)人才為手段，同時起到引導市場正確走向的作用。
[論文關鍵詞]醫(yī)學影像技術 課程設置 技能培養(yǎng)
2005年教育部頒布《普通高職高專專業(yè)目錄》（試行）“規(guī)定了專業(yè)劃分、名稱及所屬職業(yè)技術門類，反映了職業(yè)技術人才的業(yè)務規(guī)格和培養(yǎng)目標，是國家對高等職業(yè)技術教育進行宏觀管理的一項基本的指導性文件，是指導高等院校設置、調(diào)整專業(yè)、制訂培養(yǎng)方案、組織教育教學和人才預測等工作的重要依據(jù)”。在該《普通高職高專專業(yè)目錄》中，醫(yī)藥衛(wèi)生類高職高專的招生專業(yè)由原來的可以開辦相關醫(yī)學類專業(yè)調(diào)整為只能開設醫(yī)學技術類專業(yè)。在《普通高等學校高職高專（醫(yī)藥衛(wèi)生類）目錄專業(yè)簡介》中，對醫(yī)學技術類中醫(yī)學影像技術專業(yè)的主要培養(yǎng)目標、專業(yè)核心能力和專業(yè)核心課程與實踐環(huán)節(jié)作出了界定：“專業(yè)培養(yǎng)目標：培養(yǎng)掌握醫(yī)學影像學的基本理論和操作技能，從事臨床影像檢查、診斷與治療技術工作的高級技術應用型專門人才。專業(yè)核心能力：醫(yī)學影像檢查與治療技術。專業(yè)核心課程和主要實踐環(huán)節(jié)：人體解剖學基礎、醫(yī)學電子學、診斷學基礎、內(nèi)科學基礎、外科學基礎、醫(yī)學影像診斷、醫(yī)學影像檢查技術、核醫(yī)學與放射治療、醫(yī)學影像設備原理及構(gòu)造、課程實習、畢業(yè)實習等，以及各校主要特色課程和實踐環(huán)節(jié)。”該簡介中培養(yǎng)目標強調(diào)高職高專院校醫(yī)學技術應該培養(yǎng)高級技術應用型專門人才而非學科性人才。學生所具有的專業(yè)核心能力是影像檢查與治療技術。為了適應新的需求，高職高專的醫(yī)學影像技術專業(yè)只有改革傳統(tǒng)的課程設置，才能應對新形勢對高職高專院校的挑戰(zhàn)。
一、高職高專醫(yī)學影像技術專業(yè)課程設置存在的問題
（一）對課程設置闡釋
課程設置主要是指課程結(jié)構(gòu)的合理性和課程內(nèi)容安排的科學性。課程結(jié)構(gòu)的合理性指各門課程之間的結(jié)構(gòu)合理，包括開設的課程、開設的先后順序和各課程之間的有序銜接，能使學生通過課程的學習與訓練，獲得某一專業(yè)所具備的知識與能力。課程內(nèi)容安排的科學性指課程的內(nèi)容安排符合知識論的規(guī)律，課程的內(nèi)容能夠反映學科的主要知識、主要的方法論及時展的要求與前沿。課程設置必須符合培養(yǎng)目標的要求，它是一定學校的培養(yǎng)目標在一定學校課程計劃中的集中表現(xiàn)。
（二）高職高專醫(yī)學影像技術專業(yè)目前的課程設置存在的問題
存在的問題主要有：（1）課程結(jié)構(gòu)不合理。沒有合理定位影像技術專業(yè)課程。目前大多高職高專醫(yī)學影像技術專業(yè)課程不是脫胎于原來的中專學校，就是參照醫(yī)學類本科院校課程，很少做必要的調(diào)整，有的學校甚至是因人設課，能夠真正深入社會調(diào)查市場需求和用人動態(tài)而調(diào)整專業(yè)計劃并合理設置課程的高職高專院校很少。課程科目的設置往往偏重醫(yī)學類科目，學時分配不合理，單純理論性學時過多。通識類課程、專業(yè)基礎課和專業(yè)課開設不合理，通識類課程和專業(yè)基礎課所占比例過大，人文類課程太少或幾乎沒有開設。教材的選擇兩極分化，不是沿用中專的教材，就是采用本科醫(yī)學類的教材，不能反映學科的主要知識、主要的方法論及時展的要求與前沿，這就導致學生所學不多或難于消化吸收，不能符合培養(yǎng)高級應用技術人才的需求。（2）輕實踐環(huán)節(jié)，重理論課講授。高職高專院校培養(yǎng)的是高級應用技術人才，而目前高職院校的課程設置不注重實踐，單純突出理論課的講授作用，多數(shù)學校在進行課程設置時并不重視實驗環(huán)節(jié)，認為實踐內(nèi)容只是理論內(nèi)容查缺補漏的方式而已，沒有固定的實踐課程安排，實踐內(nèi)容安排的隨意性大，缺乏系統(tǒng)和科學性，完全達不到實踐課程在技術類課程中所應該具有的巨大功效。而且實踐環(huán)節(jié)往往集中安排在理論學時之后，學生只是單純按照試驗大綱或?qū)嶒炛笇нM行操作，極不利于發(fā)揮學生的主動意識和提高學生的動手意識，導致學生喪失了實踐中的探索、鉆研意識，對知識的掌握停留在表面層次上，最終培養(yǎng)出來的只能是基礎知識不牢動手能力又差的學生。（3）采取單一的考核方式，考核結(jié)果不能作為全面衡量學生能力的依據(jù)。大部分高職高專院校因為升格于中專學?；蛎撎ビ诒究圃盒?，對學生的考核方式仍舊沿襲原來學校的考核方式，主要采取單一的考核方式，側(cè)重理論知識的考核，對實踐環(huán)節(jié)的考核往往流于形式。單憑理論考試成績確定學生的優(yōu)劣，學生的實際動手與操作能力被忽略不計，學生在學業(yè)上掌握的程度不能被全面客觀地評價。從這種考核方式上反映出的教學質(zhì)量情況難免以偏概全，失去準確度。
二、應對新形勢，優(yōu)化高職高專醫(yī)學影像技術專業(yè)的課程設置
按照《普通高等學校高職高專（醫(yī)藥衛(wèi)生類）目錄專業(yè)簡介》中所界定的高職高專醫(yī)學影像技術專業(yè)的培養(yǎng)目標，醫(yī)學技術影像專業(yè)的課程設置中僅僅突出專業(yè)基礎課和專業(yè)課的實用性和綜合性還不夠，更要建立科學、系統(tǒng)和完善的實踐培訓體系。在課程設置中除加入人文知識內(nèi)容外，還應該通過課程的設置，提高學生的繼續(xù)學習和終身學習的能力。
（一）課程選擇上應立足于高職高專院校
由于高職高專院校大多提升自中專院?；蛎撎ビ诒究圃盒?，加之醫(yī)學影像技術專業(yè)的特殊性，人才培養(yǎng)方案的制訂和教學內(nèi)容不是相對滯后就是脫離高職高專院校實際，處于探索與實踐階段的高職高專院校課程建設還是參照傳統(tǒng)的醫(yī)學類專業(yè)的課程建設模式，不能脫離母體的羈絆，所做的只是在課程科目的數(shù)量和難度上加以減少和降低，而沒有開設適合高職高專的課程。為了適應醫(yī)學影像技術專業(yè)服務社會的職能，高職高專院校應該結(jié)合專業(yè)特點和市場需要，優(yōu)化原有的課程設置，脫離醫(yī)學類專業(yè)的課程體系，創(chuàng)設新的課程，增開一定門類的技術類課程。結(jié)合服務區(qū)的需要和本院校的資源與優(yōu)勢，大力發(fā)展校本教材。教師在課程內(nèi)容的選擇上要有所取舍，側(cè)重實際應用技能的展示與講解，適當減少單純的理論研究。
（二）醫(yī)學技術類專業(yè)的特點是課程體系基石，實踐內(nèi)容所占比重過小
合格的高級應用技術人才是高職高專醫(yī)學技術類專業(yè)培養(yǎng)學生的主要目標，是影像技術專業(yè)課程設置開設成敗的關鍵?？茖W、完整、合理的課程體系應該建立在工學醫(yī)學結(jié)合基礎之上，以學生為中心，以就業(yè)為導向，以能力為本位，根據(jù)就業(yè)市場用人需求，通過讓學生及早接觸與熟悉工作崗位，激發(fā)學生的學習興趣和積極性，從而提高他們的學習成績及實踐操作技能。同時要兼顧學生職業(yè)能力可持續(xù)提升，培養(yǎng)學生的繼續(xù)學習和終身學習的能力。
（三）教學內(nèi)容契合專業(yè)特點，要以影像技術崗位職能培養(yǎng)為出發(fā)點
教師安排教學內(nèi)容，必須充分考慮到醫(yī)學影像技術類專業(yè)工作職能要求，改革傳統(tǒng)的以理論內(nèi)容為主忽視實踐教學的教學方式，根據(jù)醫(yī)學影像技術類專業(yè)的人才培養(yǎng)目標、崗位的職能要求等選取課程內(nèi)容。在課程內(nèi)容的編排上，本著“理論內(nèi)容是實踐能力的基礎，實踐能力是理論內(nèi)容的升華”的指導思想，明確理論課程與實踐課程的關系，從而達到培養(yǎng)高級應用技術人才的目標。時刻以問題為基礎，知識教育與職業(yè)資格考證相融合，教學中采取院校與模擬醫(yī)院和附屬醫(yī)院結(jié)合的方式，充分利用學校影像中心和現(xiàn)代化教學設備及附屬醫(yī)院專業(yè)崗位的人力、設備等優(yōu)勢，把部分理論課堂內(nèi)容直接搬入模擬教室或到附屬醫(yī)院影像科室去講授，為學生實踐能力的培養(yǎng)提供了真實的學習場景。
（四）以堅持技能培養(yǎng)和工作相結(jié)合為出發(fā)點，積極推進整體課程實施
在具體的課程實施過程中，應該在傳統(tǒng)講授方式的基礎上，積極探索新路，注重學生校內(nèi)學習的完整性和系統(tǒng)性，做到校內(nèi)學習和實際崗位工作需求的統(tǒng)一。在專業(yè)技能課程方面，采取理論為點，實踐鋪開的方式，采用任務型教學，要以學生為中心，以實踐應用為載體，以注重培養(yǎng)學生具體的分析問題、解決問題、總結(jié)問題能力為目標，為學生理論素養(yǎng)和實際應用能力的可持續(xù)提升提供一個有效和良好的途徑。
采用模塊化教學方式，將醫(yī)學技術類專業(yè)的專業(yè)課程設置為一個總教學模塊，參照綜合醫(yī)院影像科的設置來設置子教學模塊，也就是各門課程所包含的章節(jié)。這樣各門課程之間的銜接上就會避免出現(xiàn)錯位現(xiàn)象。學生在系統(tǒng)學習掌握好實際操作后既可勝任醫(yī)院影像科的某一個職業(yè)崗位工作，學校也可根據(jù)各級醫(yī)院影像科不同的職業(yè)崗位需要培養(yǎng)學生的崗位職業(yè)技能。這樣，既便于安排各門課程的教學進程，又可讓學生根據(jù)自己的個性發(fā)展及就業(yè)崗位意向重點選擇一個或幾個課程模塊，畢業(yè)后能很快適應工作。
改變傳統(tǒng)的考核方式，淡化成績觀念，提高能力衡量分值。采用筆試+ 技能操作+ 平時作業(yè)+ 實踐報告的綜合考評方式。通過測評，客觀公正地評價學生的專業(yè)基本理論知識、專業(yè)技術能力。重視實踐考核的績效分值，使其考核總分值與理論考試成績權重相等?？己藘?nèi)容以醫(yī)學影像技師所應掌握的技術標準，考核學生的實際操作技能、臨床思維能力、解決實際問題的能力。
（五）加大實踐教學內(nèi)容的比重，培養(yǎng)學生實際操作能力
實踐性教學相對于理論教學而言，有著它自己的獨立性，通過加強實踐教學能夠印證學生在理論課中掌握的理論知識，能提高學生的綜合素質(zhì)、更好地培養(yǎng)學生的創(chuàng)新精神和實踐能力，起著日常理論教學所不可替代的特殊作用，通過加大實踐教學在課程設置中的比重，能有利于“高技能應用型人才的培養(yǎng)”。在實踐性教學所包含的實驗、實訓與實習三大環(huán)節(jié)中，不但要認真編制實踐教學大綱與計劃，還應該對實驗內(nèi)容及方法進行合理改革調(diào)整，在實驗中，指導教師一定要精于演示，才能帶動學生，促進學生的實際技能操練?？梢圆捎胷ole playing的方式，在實驗與實訓中讓每兩位學生結(jié)成訓練對，分別扮演醫(yī)生和患者的角色進行操作訓練并互換角色，教師對于學生操作中存在的問題和不足及時給予指導。實踐教學是影像技術專業(yè)的重點和難點，是一門應用性的學科， 應該著重培養(yǎng)學生的動手能力和解決實際應用的能力。在日常教學中還應該適當增加實訓教學，每學期抽出一定的時間，以“模擬醫(yī)院的方式將醫(yī)學模擬設備應用于影像技術專業(yè)技術實踐教學， 倡導以貼近醫(yī)院的真實環(huán)和更符合醫(yī)學倫理學的方式開展實踐和考核”?；蛘邘ьI學生到附屬教學醫(yī)院，充分利用醫(yī)院的影像設備提高學生的綜合能力和臨床實際操作技能。在臨床實習教學中，充分安排學生在三級以上具備CT、MRI等大型影像設備以及具有較高診斷和操作技術水平的教學醫(yī)院實習，開展技能實訓，讓學生在崗位的氛圍中印證所學專業(yè)知識，激發(fā)學生的學習熱情。健全實習管理制度，確保實習質(zhì)量。
（六）立足校本實際，深化豐富教學資源
課程設置的成功依賴于學校提供的教育資源。首先要加強師資隊伍的建設，教師的整體素質(zhì)決定了課程的實施。作為應用型的醫(yī)學影像技術專業(yè)，教師不但要有扎實的理論功底，還要富有前瞻性，能夠站在技術的最前沿，要充分掌握本行業(yè)的工作背景和行業(yè)發(fā)展情況。院校在師資的培養(yǎng)上要注意突破教師的單一教書職能，積極鼓勵教師到醫(yī)療衛(wèi)生行業(yè)的一線進行充分的理論實踐，豐富教師的專業(yè)素養(yǎng)。同一門課程可以由不同的教師承擔，互幫互學，取長補短。院?？梢愿鶕?jù)需要合理地甄選本行業(yè)優(yōu)秀人才做兼職教師，與專任教師發(fā)揮各自所長，共同承擔課程的教學任務。
積極研制與開發(fā)校本教材，從本院校與服務區(qū)的實際出發(fā)，增強專業(yè)課程的適應性。在《普通高等學校高職高專（醫(yī)藥衛(wèi)生類）目錄專業(yè)簡介》中，鼓勵各個高職高專院校開設學校的特色課程。而目前大多院校的課程建設研究只是初級階段，基本是沿用原來的老教材，目前還沒有使用效果更好、具有影響力的教材。所以院校應該根據(jù)影像技術專業(yè)的特點，大力進行校本教材的開發(fā)。根據(jù)醫(yī)學影像技術專業(yè)特點和職業(yè)崗位的要求，可以由院校和附屬醫(yī)院共同合作編寫醫(yī)學影像技術專業(yè)特色教材及與之相配套的實驗、實訓指導書，并由附屬醫(yī)院共同承擔部分專業(yè)課程的教學與實訓工作。充分利用各種渠道、各種方式和現(xiàn)代教育技術，改革教學模式，以提高提高學生專業(yè)技能水平為目標，為畢業(yè)生在各級醫(yī)院就業(yè)做好更充分的崗位適應準備。鼓勵教學一線教師積極采用國內(nèi)外同類課程的優(yōu)秀教材，通過對該教材內(nèi)容的吸收與消化，并結(jié)合本校實際和專業(yè)的特點進行適當?shù)恼{(diào)整和進行校本化處理，提高教材的適用性。體現(xiàn)醫(yī)學影像技術類專業(yè)的特點，理論知識宜廣不宜深，實踐內(nèi)容要以就業(yè)崗位職能為依據(jù)。充分利用學?，F(xiàn)有的教學資源，同時加大資金投入，購入先進的教學設施和相應的實驗設備，充分滿足教學需要。
人類已經(jīng)邁入21世紀，隨著科技的進步和人民生活水平的提高，社會對各類醫(yī)學人才的需求急劇加大，所以醫(yī)學影像技術專業(yè)必將會有極大的發(fā)展空間。為了應對新的機遇，高職院校醫(yī)學影像專業(yè)必須深化課程改革，了解課程結(jié)構(gòu)的現(xiàn)狀，深入分析其不足，對現(xiàn)有課程結(jié)構(gòu)體系進行變革，按照有關依據(jù)和原則構(gòu)建合理的課程結(jié)構(gòu)，以培養(yǎng)一大批適應市場需求的專門人才。
臨床醫(yī)學檢驗技術質(zhì)量管理中存在的問題及對策
21世紀是科學快速發(fā)展的世紀，隨著臨床醫(yī)學、電子學等學科的發(fā)展，新的檢驗技術和自動化儀器的應用為臨床醫(yī)學檢驗工作帶來很大的便利與可靠性。檢驗科主要為臨床提供高質(zhì)量的檢驗報告，檢驗質(zhì)量的高低直接影響著臨床的工作[1]。臨床醫(yī)學檢驗技術在醫(yī)療過程中具有重要作用，對醫(yī)學發(fā)展占據(jù)著重要位置，同時關系到國民身體素質(zhì)的保障，影響著社會的和諧與穩(wěn)定。
技術的發(fā)展需要管理的配合，然而現(xiàn)時的質(zhì)量管理跟不上技術的快速發(fā)展的腳步，在質(zhì)量管理中存在著許多漏洞，給人民與社會造成很大的困擾。本文著重探討臨床醫(yī)學檢驗技術質(zhì)量管理中存在的問題，提出解決問題的對策。現(xiàn)報告如下：
1臨床醫(yī)學檢驗技術質(zhì)量管理中存在的問題
1.1醫(yī)療機構(gòu)檢驗條件與技術配備不合理。醫(yī)院里表現(xiàn)床位時常面臨緊缺之勢，房間設計格局不合理，患者不能及時得到檢驗結(jié)果，易引起病人及家屬的焦躁與暴怒。部分實驗室布局不符合安全防護要求，缺乏長遠計劃。檢驗硬件設備跟不上技術發(fā)展的腳步，儀器設備長時間得不到更新和添置而有趨于老化之勢。
1.2實驗室室前檢查不合理。臨床醫(yī)師為患者開據(jù)檢查申請單，病人按醫(yī)囑要求留取標本送檢。部分臨床醫(yī)師對沒有針對患者的病情申請送檢，而且不少檢查項目的臨床意義不是十分明了，檢查的目的性不強。更有部分醫(yī)師因為診斷不出問題，而隨便讓病人進行抽血與進行其他無意義的形式檢驗，讓病人及本文由論文聯(lián)盟//收集整理其家屬費時費力，同時又增加病人的經(jīng)濟負擔。而病情確又得不到緩解，從而失去了對醫(yī)院的信心而選擇不就醫(yī)。
此外，臨床科室標本抽取時間遲早不一，導致待檢標本時間過長而影響檢驗結(jié)果。部分護士抽取標本的操作不規(guī)范，致使檢驗結(jié)果與理論結(jié)果出現(xiàn)較大差異，給臨床醫(yī)師的判定造成了極大的誤導。醫(yī)師無法對癥下藥，也是導致患者再不肯就醫(yī)的重要原因。部分質(zhì)量控制管理人員理論知識薄弱、知識更新遲緩。質(zhì)控管理人員運用舊理論知識進行檢驗操作，不可避免地造成系統(tǒng)的誤差判斷。
1.3文件管理無序，有失規(guī)范。文件管理是檢驗科開展和進行各項工作的基本準則[2]，科學規(guī)范的文件管理模式與制度才能保證檢驗科工作的規(guī)范化、標準化及其可靠性。部分檢驗人員對文件管理的概念及其意義不熟悉，在編寫和建立程序檔案文件時分類不合理、書寫不規(guī)范，檢驗原始記錄不完整，達不到檔案保存的基本要求。檢驗科管理人員沒有對實驗室進行不定期的質(zhì)量檢查，致使錯誤無法得到及時糾正與修改。另外，管理人員對儀器使用、維護、校準等賬目不夠健全，質(zhì)控品與校準品存在混淆的問題，以致使用不正確，極大地影響著檢驗結(jié)果。
1.4檢驗人員與臨床醫(yī)師之間的關系不甚和諧。當前醫(yī)院檢驗人員與臨床醫(yī)師的矛盾問題日益突出，極大地影響著醫(yī)療合作關系。臨床醫(yī)師希望檢驗人員能幫助尋找患者的病源，但缺乏對檢驗知識的深入理解，容易出現(xiàn)混淆檢測項目的現(xiàn)象。而檢驗人員又總是希望臨床醫(yī)師理解檢驗技術的一些高度專業(yè)化的難度，彼此之間又缺乏溝通與交流，日積月累，從而在檢驗人員與臨床醫(yī)師之間樹起了一道交流屏障，導致關系的彼此不協(xié)調(diào)。
2針對臨床檢驗工作中的問題提出措施與對策
2.1加強設備管理，改善檢驗環(huán)境。根據(jù)技術要求，配備適合的檢測儀器。時刻緊跟國際技術發(fā)展的腳步，引進測試領域廣、精度高的儀器設備。完善各項儀器和管理，實行“一對一”或“二對一”專人專隊管理與護理。檢驗室對檢驗人員嚴格操作規(guī)程，對儀器設備的購進、建檔、使用操作管理、人員職責均作出明確規(guī)定，以提高儀器的護理質(zhì)量，保證儀器的完整性和設備檢測的準確率。
2.2完善實驗室前檢查制度，提高質(zhì)控質(zhì)量。要求臨床醫(yī)師及檢驗人員提高自身素質(zhì)，對臨床醫(yī)師要求提高與擴展初診知識，對檢驗人員加強業(yè)務知識培訓，提高檢驗人員素質(zhì)。增強工作職員應對醫(yī)療突發(fā)事件的應急能力，對新知識、新測定辦法、新儀器的操作原理和步驟應實行重點培訓并嚴格考核。強化標本采集，檢驗科要做到嚴格的質(zhì)量控制措施，規(guī)范化、標準化、系統(tǒng)化檢驗工作，嚴格認真做好室內(nèi)、室間質(zhì)控，確保測定結(jié)果的精確度和精密度，減少試驗操作經(jīng)過中批間和日間標本檢測結(jié)果的誤差，使檢驗質(zhì)量顯著提升。
2.3制定文件管理規(guī)范，并嚴格執(zhí)行。實行科主任負責制、健全文件管理系統(tǒng)[3]。要求檢驗單由具有處方權的醫(yī)師逐項填寫，檢驗人員需經(jīng)檢驗科主任審批報告權后方能簽發(fā)報告，檢驗結(jié)束，檢驗單及報告均應備份存檔。制定檢驗儀器操作手冊，并定期進行修訂。檢驗負責管理人員定期向科主任申請檢查各種試劑的質(zhì)量和所用儀器的靈敏度，精密度，定期進行校正。健全登記統(tǒng)計制度，對各項工作的數(shù)量和質(zhì)量進行登記和統(tǒng)計，要填寫完整、準確，妥善保管，并實行歸檔存檔。同時加強儀器、試劑的管理，建立大型儀器檔案。建立崗位責任制，實行專人負責。
2.4促進檢驗人員與臨床醫(yī)師之間的交流。檢驗科要加強和臨床科室的互動合作與交流，醫(yī)院開展各科室的交流活動，要求各科室的人報告自己科室的最新發(fā)展。檢驗科人員要求理解臨床常見病例和高發(fā)病例的相關醫(yī)學知識，不斷學習和積累臨床知識和臨床工作經(jīng)驗，提升專業(yè)檢驗能力。臨床醫(yī)師要求理解檢驗技術的一些高度專業(yè)化的難度，隨時跟進檢驗科的技術發(fā)展。
總述：隨著醫(yī)療衛(wèi)生改革的不斷深入，繼國家對藥品進行嚴格的管理之后，臨床檢驗質(zhì)量管理開始提上重要的議事日程。在臨床醫(yī)學檢驗工作的過程中，應該將質(zhì)量放在核心，不斷提高檢驗人員的質(zhì)量意識，減少因為標本因素對檢驗結(jié)果產(chǎn)生的消極影響。
隨著醫(yī)學模式的轉(zhuǎn)變，衛(wèi)生改革的不斷深入，寬口徑培養(yǎng)、擴大知識面，已成為高職醫(yī)學教育的一個教學改革重點，即除了學習本專業(yè)知識外，還要學習相關學科和跨學科的綜合性課程，注重醫(yī)學教育對學生的人性化和多種能力的培養(yǎng)，以使高職專業(yè)的學生將來有一定的發(fā)展動力和能力。為此，為順應學生發(fā)展的需本文由論文聯(lián)盟//收集整理求，我們結(jié)合這幾年對臨床醫(yī)學專業(yè)《常用護理技術》課程教學的了解和對學生的問卷調(diào)查，從2008年開始我們教研室改革了我院臨床醫(yī)學專業(yè)《常用護理技術》課程的教學，得到了學生的好評。
1 課程目標：
通過本課程的學習，使臨床醫(yī)學專業(yè)學生在了解和掌握某些護理理論、護理技術的同時，學會與人、與患者的溝通的技巧，培養(yǎng)與患者建立良好人際關系的能力，也為今后與護理人員在醫(yī)療護理工作中的良好合作打下基礎。并且能了解社區(qū)護理的的特點，為使以后走向社區(qū)打下基礎。
2 教學對象與教學安排：
三年制統(tǒng)招的高職高專臨床醫(yī)學專業(yè)學生。本課程安排在第二學年第二學期，為時9周，周學時6學時。理論與實驗學時比為1：1。
3 課程內(nèi)容與學時安排：
4 教學方法：
4.1 理論性強的章節(jié)如緒論、護理程序、職業(yè)防護等以課堂講授為主，突出要點，配以一些實況錄像資料.，如護理程序在臨床上的運用過程錄像。
4.2 人際溝通理論與技巧采用設置情景案例，在學生討論和表演中教師道出或總結(jié)出人際溝通的基本理論知識，課下留下情景案例作業(yè)做思考，學生實習課上練習。
4.3 常用護理技術課堂實習很重要，采用學生先自學再看錄像，然后在課堂上進行規(guī)范示教，示教中引進涉及到操作的理論知識，示教完畢學生立即進入練習。
5 體會與討論：
培養(yǎng)具有較高的綜合素質(zhì)、寬闊的知識面、較強的溝通交流能力的醫(yī)學生已逐漸成為高等職業(yè)教育的培養(yǎng)目標，針對醫(yī)學生開設人文學科課程已得到醫(yī)學教育界的共識。但由于一些觀念和重視度的問題，再加上三年制高職醫(yī)學專業(yè)學制短學時緊張，所以一些院校還是十分重視醫(yī)學專業(yè)的學習，雖然近幾年按照教學計劃加設了30學時左右的護理技術課程，但仍忽視高職醫(yī)學生溝通能力和多種知識結(jié)構(gòu)的培養(yǎng)，這對于
高職學生今后的發(fā)展不利。在教學中我們體會到，學生對于本課程加設的內(nèi)容很感興趣，從對學生的調(diào)查顯示，100%的學生認為本課程的開設很有必要；99%的學生表示本課程對于拓寬知識面和對以后的工作會有幫助；61%的學生對所學的內(nèi)容認為不夠用，應該在加進一些；并有65%的學生認為應增加各方面內(nèi)容的實驗課學時。為此，我們采?。海?）每周開設兩次實驗室，派專職教師值班，學生可進行學習和練習。（2）計劃在課外時間開設選修課程，如人際溝通學、感染的預防和控制理論、護理的一些理論（需要理論、應激理論等）、老年護理等。（3）在以后的教學中多采用現(xiàn)代化的教學手段以使學生在有限時間內(nèi)了解的信息更多、留下的印象更深。
總之，在高職醫(yī)學專業(yè)教學中開設護理學課程的內(nèi)容是很有必要，我們也會不斷改進教學內(nèi)容和教學方法，以提高高職醫(yī)學生的人才質(zhì)量。
【摘要】 dna鑒定技術在現(xiàn)代法醫(yī)物證檢驗中有著廣泛的應用，其應用分子生物學的方法，對犯罪現(xiàn)場遺留的生物物證所含的dna與犯罪嫌疑人的dna樣本進行比對，鑒定dna結(jié)構(gòu)是否相同，從而對生物物證是否來自于犯罪嫌疑人作出評價。不過大多犯罪現(xiàn)場遺留的生物樣本存在著許多不利于法醫(yī)提取的因素，比如腐敗、變質(zhì)、污染等。本文就現(xiàn)場dna提取純化技術方面來介紹當今法醫(yī)學的技術進展。
【關鍵詞】 dna 提取 硅珠 磁珠
自從20世紀80年代dna技術問世以來，改變了過去對生物物證的檢驗只能“否定”不能“認定”的歷史。利用dna鑒定技術，可以直接“認定”犯罪現(xiàn)場的血跡、精斑、毛發(fā)、唾液斑等生物檢材是否為犯罪嫌疑人所留，從而為案件的偵破、訴訟提供有力的證據(jù)。目前，dna鑒定技術在生物物證檢驗中的應用非常廣泛，在傷害、強奸、交通肇事、親子鑒定等刑事或民事案件中，現(xiàn)場遺留的血跡、精斑、骨骼、肌肉、毛發(fā)、唾液斑、尿斑、指(趾)甲、汗液指紋等生物物證都是dna鑒定的常見檢材，dna鑒定結(jié)論是許多刑事案件的重要證據(jù)之一。
眾所周知，要想對dna進行鑒定，必須得到足量且純凈的dna樣本， dna提取純化技術是法醫(yī)dna檢驗的第一個步驟，也是最關鍵的步驟。從犯罪現(xiàn)場提取的血痕或精斑，或者是從嫌疑人或親緣鑒定中提取的血液樣本，這些生物檢材中除了dna外還包括許多物質(zhì)，在分析dna之前，必須將dna同其他物質(zhì)分離開來?？梢哉f，能否成功進行dna檢驗取決于能否從生物檢材中獲得高質(zhì)量dna。尤其對于腐敗、變質(zhì)、污染等各種條件下的現(xiàn)場生物檢材，dna的提取質(zhì)量將直接關系到dna檢驗的成敗。
目前法醫(yī)dna實驗室最常見的2種dna提取方法是：酚-氯仿提取法、chelex提取法。雖然這些方法是被廣泛應用于法醫(yī)學檢材，但是不得不承認，他們各自都有著不可避免的缺點。
酚-氯仿提取法：在dna提取過程中，涉及到一些危險的化學物質(zhì)，耗時。而且有些色素和泥土中能被醇沉的雜質(zhì)不易被去除。同時，由于操作中涉及到多次轉(zhuǎn)移樣本，這樣很容易造成dna丟失，dna提取率低，增加錯誤或污染的幾率。[2]
chelex提取法：該方法雖然提取dna量較多，但對微量、污染的檢材效果欠佳。而且該方法提取的dna中常存在pcr擴增抑制物，且不宜長期保存，這些都可能使擴增效率下降或擴增失敗。[1-3]
由此看到，雖然這些方法可以提取出較多的dna樣本，但是由于提取純度較低，含有較多pcr抑制物，影響了接下來的擴增過程，這樣也就影響了dna的檢驗。所以如何能提取出較純凈的dna顯得十分的必要。在此，我想介紹兩種更為有效的dna提取純化技術。
1 以二氧化硅為基礎的提取純化法
這種方法是近幾年才發(fā)展起來的高通量dna提取純化方法。其中最多見的就是以硅珠或硅膜為基礎的提取方法。其基本原理是[4-6]，核酸在高濃度高離液鹽例如氫氯酸胍、硫氰酸胍、碘化鈉和高氯酸鈉環(huán)境中，通常用的是硫氰酸胍，選擇性地吸附在類似玻璃珠的硅支持物上。這些高離液鹽可破壞液態(tài)水中的氫鍵網(wǎng)格，使變性的蛋白質(zhì)和核酸比其在折疊或配對結(jié)構(gòu)的情況下更具有熱力學穩(wěn)定性[7]。由于硫氰酸胍是高性能的蛋白質(zhì)變性劑，可以使蛋白質(zhì)與dna分離，在硅支持物吸附前高速離心可以將變性的蛋白質(zhì)、雜質(zhì)等不容物除去，吸附后漂洗可以將溶液中的pcr抑制物除去，因此提取的dna比較純，速度快，且不會受檢材條件影響。
實驗表明[8]，0.5-1μl新鮮血液就可以提取出足以成功擴增的dna。在不同的檢材，如新鮮腦組織、皮膚、泥土上血跡、深色布血跡、火場尸體骨松質(zhì)、深色布混合斑中提取的dna均可成功擴增，不受檢材種類的影響。同時，通過對chelex法，酚-氯仿法和二氧化硅膜法3種dna提取法在污染嚴重混合斑分型中的應用效果的比較[2]，發(fā)現(xiàn)二氧化硅膜純化技術可以有效去除pcr抑制物，提取的dna擴增效果明顯優(yōu)于chelex法和酚-氯仿法，具有較高的應用價值。
2 納米磁珠法
納米科技是近年來國際上最為活躍的研究領域之一，取得了諸多舉世矚目的成就，尤其是在解決生物學、醫(yī)學難題上展示了廣闊的應用前景。磁性納米技術是納米技術的一個分支，對于dna提取技術而言，磁性納米技術將具有常規(guī)提取方法所無法比擬的獨特優(yōu)勢，因此將磁性納米技術應用在法醫(yī)學界將有著廣泛的前景。而磁珠提取法就是其中最常見的方法。磁珠的主要制作步驟是這樣的[9]：首先制備5-8nm的磁性納米粒子，使其具有很高的磁場響應能力和超順磁特性，能夠通過改變外磁場實現(xiàn)納米調(diào)控；然后利用包覆技術，對磁性納米粒子進行包覆，為進一步修飾功能團提供載體，減少與生物組織的非特異性作用，對內(nèi)部的磁性納米粒子起到保護作用；接著利用表面化學修飾技術，連接可特異地與dna發(fā)生作用的功能團[10]，修飾的功能團必須具有對dna可逆吸附的特性，從而實現(xiàn)控制dna吸附、解離和減少與其它雜質(zhì)非特異性吸附的目的；最后通過表面修飾和溶液中離子強度、ph等條件的控制，使每次操作均能獲得準確數(shù)量dna，保證后續(xù)檢測分析的高成功率。
磁珠法提取純化dna的原理與硅珠相近[11,13]，先利用硫氰酸胍等強烈蛋白變性劑，破壞細胞膜及核膜蛋白，釋放dna，并使核酸酶失活；然后加入磁珠通過表面的化學集團與dna特異性吸附，而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不被吸附而留在容夜里；接著在磁場的作用下，磁性顆粒與液體分開，回收顆粒；最后再用純水或te洗脫吸附的dna，在溶解液中進行dna與磁珠的解離，將dna重新溶出。
與其他常見提取方法比較，磁珠法有著顯著的優(yōu)勢[9,12]:1納米材料具有小尺寸效應和表面效應，能夠用于高效dna提取，滿足微量生物樣本dna提取的要求，實驗表明，即使是0.5μl血仍能得到dna分型，而同樣的血量用chelex提取dna優(yōu)勢不能得到分型，甚至當溶液中dna含量僅為100pg時，dna回收率仍然達到90%以上[13]；2納米材料表面能夠進行化學修飾，從而與dna進行特異性吸附，去除樣品dna溶液中的pcr抑制物質(zhì)，如有機溶劑、去污劑、金屬離子、染料等；3納米粒子表面功能團數(shù)量可以控制，獲得所提取dna溶液的濃度信息，實現(xiàn)定量的要求；4磁性納米材料可以通過特殊的合成工藝，使其具有超順磁特性，因此能夠通過儀器進行自動化操作，滿足數(shù)據(jù)庫建設大批量樣本提取的需要，減少人為因素影響[14]；5用時少，操作簡單，適用于大多數(shù)生物檢材。對于經(jīng)驗較少的初學者而言，按照簡單的程序化操作，也能夠獲得滿意的dna提取結(jié)果；6價格低廉，便于廣泛應用。由于納米材料合成采用的都是低價無機和有機原料，無須特殊的儀器設備，使得最終的合成和研發(fā)成本都很便宜。
dna鑒定技術作為法醫(yī)鑒定的重要手段，它的科學性和實用性已得到廣大司法部門和社會各界的一致認可和高度重視。目前運用dna技術在刑事案件以及各種案件中進行檢驗已經(jīng)是常用手段之一。而以上介紹的技術也只是整個鑒定技術的一環(huán)，樣本的收集、str分型等一系列步驟的每個因素都可能影響dna分析結(jié)果。不過相信在科學技術迅猛發(fā)展的今天，國內(nèi)外學者會研究出更多更靈敏，更簡便，更經(jīng)濟的方法，來未法醫(yī)學界或者更大的領域服務。
隨著科學技術的迅速發(fā)展，人類積累的知識量越來越多，知識更新的速度也越來越快，促使教學手段的不斷更新。多媒體教學以其課堂信息量大、題材豐富形象、形式活潑多樣等特點，在地方醫(yī)學院校得到了廣泛的普及。藥學學科中大部分主干課程內(nèi)容繁多，儀器結(jié)構(gòu)復雜，原理抽象，涉及應用面廣，如有機化學、分析化學、儀器分析、物理化學、藥物化學、生藥學、藥物分析、藥理學等課程，使得課程的學習變得困難，也為教學工作提出了更高要求。多媒體和網(wǎng)絡技術的運用有著其它教學手段所無法比擬的優(yōu)勢，突破了傳統(tǒng)的教學手段和教學思想，使教學更加靈活、有效和充滿吸引力。因此，如何使多媒體技術在網(wǎng)絡環(huán)境下更好地為現(xiàn)代藥學教育服務，是當今藥學教育改革的方向之一，本文試圖通過理論和實踐來探索基于現(xiàn)代教育技術的藥學教育教學的模式。
1 現(xiàn)代多媒體技術在藥學教學中運用的特點
教育手段現(xiàn)代化的有效性，是教師探索課堂教育方法、手段的方向。要在40min的課堂教學中提高教學的效益，進行高密度、高容量的教學，多媒體的應用勢在必行。
1.1 多媒體教學的優(yōu)點
1.1.1 提高學生思維能力，增強教學效果
藥學教學需要立體形象思維，而多媒體在信息處理方面是極為豐富的，能把多種信息的不同表現(xiàn)形式通過聲音、圖形、動畫、視頻、文本同時展示于學生面前，使學生能從中體驗形象與抽象的關系，這非常符合藥學教學的需要。多媒體課件的應用，代替了一幅幅粗糙的掛圖和一具具笨重的模具，其多變的畫面、生動的形式、豐富的內(nèi)容、圖文并茂的表達方式，有利于學生思維的發(fā)展，大大提高了教學效果。
例如，在《藥理學》中講解治療高血壓藥物的作用機制時，通過圖片動畫展示有的藥物作用于血管，通過擴張血管降壓，有的藥物作用于腎臟，通過利尿降壓，還有的作用于血管緊張素等等，這樣的圖片動畫，使藥物作用的部位形象化，作用機制也更具條理性，同學觀看時，再結(jié)合教師課題講解，使學生的認識從抽象一具體一抽象的過程中達到對知識的深刻理解。
1.1.2 提高學生學習的主動性和興趣，提高課堂教學效率
多媒體教學提供比課本更豐富的形式多樣的多媒體素材，使原先抽象的不容易理解的內(nèi)容通過多媒體形式生動、形象具體的表現(xiàn)出來，使學生一看就懂，一看就通，如《儀器分析》課程中，在講解高效液相色譜儀時，通過網(wǎng)上找到的流程圖動畫或制作虛擬實驗室軟件，不僅清楚地展現(xiàn)了樣品進入色譜柱是如何被吸附、洗脫、分離的，而且展現(xiàn)了儀器使用的操作過程及注意事項，課件直觀又易懂，還能挖掘出學生的思維能力，教師授課輕松，培養(yǎng)學生學習興趣，激發(fā)學習主動性，提高課堂教學效率。
1.1.3 交互性強，提高學生的學習能力
多媒體教學具有交互性，學生主動地介人到教學活動中來，學生在學習中可以根據(jù)自己的能力和興趣去自由選擇學習內(nèi)容，自行調(diào)整學習進度，自我選擇適合自己的不同難度的教程，變過去單向被動的接受學習為雙向主動的學習。多媒體課件可應用于學生的復習和自學，其良好的界面、良好的交互性，可實現(xiàn)教育的個體化。學生可選擇學習內(nèi)容，對于沒有掌握的內(nèi)容，可反復演示；對于新的內(nèi)容，便于學生自學。如在課件中增加測試內(nèi)容，在一個章節(jié)學習結(jié)束后，還可通過測試了解學生對所學知識的掌握程度?？墒菇虒W從灌輸變?yōu)橹鲃訉W習，從而有效地發(fā)揮主觀能動性，提高學生的學習能力。
1.1.4 對藥學實踐課程示教的補充
藥學是一門實踐性很強的學科，我校藥學專業(yè)的學生必須掌握藥學的基本操作技能。然而往往由于實驗經(jīng)費不足、儀器配備不夠等客觀條件制約，無法讓每一位同學親自動手操作，特別是分析儀器的操作，對操作人員的掌握能力要求較高，造成理論與實踐脫節(jié)。多媒體技術的應用，可以在一定程度上作有益補充。通過建立各種藥用植物形態(tài)、藥用植物微觀結(jié)構(gòu)圖像庫，建立虛擬實驗室，學生隨時可以學習，在學生實習前的培訓時，可以通過在模擬企業(yè)的各生產(chǎn)工藝、崗位等環(huán)節(jié)上進行充分的操作演練，有助于學生對實習生產(chǎn)整個工藝流程快速認識與掌握。
2 現(xiàn)代教育技術在我校藥學教育中應用所取得的成效
藥學學科教學設置包括藥學基礎學科和藥學專業(yè)學科，這些學科課程特點是：理論知識涉及的化學專業(yè)、藥學專業(yè)知識面較多，課程內(nèi)容繁多，實踐性強，課時有限，諸如有機化學、分析化學、藥物化學、生藥學、藥物分析等。傳統(tǒng)的教學方法使得學生們在學習過程中，感覺難以理解和掌握，特別是學習植物形態(tài)、分類知識、植物解剖部分的知識，藥物的化學結(jié)構(gòu)及構(gòu)效關系理論，儀器結(jié)構(gòu)及原理時感覺非常抽象，很難接受。因此學習的積極性受到了一定的挫傷，大部分學生僅僅是為了應付期末的考試，主動學習、自覺學習的很少。為了適應藥學學科的不斷發(fā)展和藥學教育改革的需要，我們從2002年開始，將多媒體及網(wǎng)絡技術引入到藥學學科教學改革中，如藥學相關課程的授課課件、實踐教學及實習基地建設等，有目的、有計劃地進行了一些嘗試，經(jīng)歷5年多教學實踐，摸索了一定的教學經(jīng)驗，取得了一定的成效，主要表現(xiàn)在以下幾個方面。
2.1 多媒體課件的設計
2.1.1 基礎化學課件的設計
在基礎化學的教學中，常有原子結(jié)構(gòu)和分子結(jié)構(gòu)的教學，如有機化學的教學，傳統(tǒng)的教學模式介紹s、p、d原子軌道和雜化分子軌道的模型時，通常采用掛圖、模型在課堂上作演示，由于掛圖不能長久使用，若不能及時更換也將影響教學效果；而現(xiàn)在理論課大多在大教室授課，模型相對較小，演示時大部分學生看得不清楚，影響教學效果，給學生的學習帶來了較大的困難。將多媒體技術運用于基礎化學教學，極大地改變了傳統(tǒng)的教學模式，我們運用cs chemoffice制作了s、p、d原子軌道的三維模型、部分雜化分子軌道的三維模型等，學生不僅可以清楚地看到原子、分子軌道的三維模型，還能從各個角度觀看原子、分子軌道的動態(tài)三維模型，從而使原子及分子結(jié)構(gòu)的教學變得直觀、生動、有趣。藥學院有機化學課件制作獲廣西多媒體課件大賽三等獎。
2.1.2 開發(fā)設計虛擬實驗室
利用多媒體開發(fā)設計語言vb及動畫制作工具flash mx開發(fā)設計分析天平、氣相色譜、高效液相色譜的虛擬實驗系統(tǒng)應用軟件，可用于教學、演示、練習及實驗考核。這些軟件與傳統(tǒng)的實驗方式最顯著的區(qū)別在于它具有極強的交互性、自適應性及集成性。它的交互性創(chuàng)造了一個人性化的實驗環(huán)境，使學生能夠在自然、親切的氣氛中進行學習和操作，從而極大地提高了學習興趣。自適應性打破了時間、空間上的限制，只要在一臺計算機上通過校園網(wǎng)就可以自如地去學習與操作，無須擔心因操作失誤而損壞儀器。它的集成性是使教、學、自測和考核等功能融為一體，獲得事半功倍的功效。學生通過“錯誤查詢”按鈕，可及時發(fā)現(xiàn)操作錯誤，以便糾正。我們自2004級藥學本科起用于實驗教學中，深受師生的歡迎，大大提高了實驗的教學效果和教學質(zhì)量。
2.1.3 建立多媒體實驗教學平臺
在此基礎上，開展藥劑學、生藥學等實驗人機互動實驗教學平臺，編制了cai課件，建立了多媒體實驗教學系統(tǒng)，保證在實驗教學過程中實驗教師的示范手法、實驗手段、實驗過程及結(jié)果觀察等通過屏幕實時展示，并可根據(jù)學生的實驗需要反復播放，使復雜的實驗儀器原理、操作步驟簡單化、圖像化、形象化；結(jié)合動畫制作生產(chǎn)工藝流程、設備流程和設備結(jié)構(gòu)原理，較好地再現(xiàn)了藥品生產(chǎn)的過程。
2.2 模擬實習前的崗前培訓，提高藥學專業(yè)學生專題實習的質(zhì)量
到目前為止，我們與廣西、廣東、北京、湖南、湖北等地的近60家科研機構(gòu)、制藥企業(yè)、醫(yī)療機構(gòu)、醫(yī)藥公司建立了學生實習聯(lián)系，并在33所區(qū)內(nèi)外的實習點掛牌，建立了穩(wěn)固的實習聯(lián)系。針對實習單位的需求，為了讓學生更好地了解實習單位的工作流程、操作技術及技能、管理規(guī)定等內(nèi)容，我們在制訂2011屆藥學本科學生的培養(yǎng)方案中加大了見習時間，增大學生對實習單位的直觀認識，提高學生的實習效果。如學生到制藥企業(yè)實習前，結(jié)合企業(yè)機器檢修和上新設備時，讓學生進廠參觀實習，同時，制作實習前的仿真軟件，基本與生產(chǎn)的環(huán)境一致，使人一目了然，學生可以通過在模擬企業(yè)的各生產(chǎn)工藝、崗位等環(huán)節(jié)上進行充分的操作演練，有助于學生對實習生產(chǎn)整個工藝流程快速認識與掌握。而且，我們利用網(wǎng)絡技術建立與加強與實習基地的聯(lián)系，及時了解學生在實習過程中的表現(xiàn)，學生專題實習的質(zhì)量及存在的問題，并及時與實習基地溝通、協(xié)調(diào)與解決，不斷地調(diào)整教學計劃和教學內(nèi)容，適應地方經(jīng)濟發(fā)展對藥學專業(yè)人才的需求。
2.3 設計課程教學案例，改革教學方法
我們已初步形成藥學網(wǎng)絡實踐教學的平臺，在教學的過程中可以根據(jù)課程實踐內(nèi)容的特點，選擇相應的教學方法。以我校藥學院藥物化學課程為例，該課程按照能力劃分為基礎能力、應用能力和綜合拓展能力三個模塊，針對不同的能力模塊，設計相應的學習情境，選擇合適的教學法。如在基礎能力模塊中，重在培養(yǎng)學生掌握藥物化學的基本操作技能，多采用實驗教學法，教師與學生共同參與；在應用能力模塊中，以學生為主體，教師引導學生完成專題項目任務，采用行動導向的項目教學法，提高學生的實踐能力；在綜合拓展能力模塊中，對學生的綜合能力提出更高要求，采用行動導向的協(xié)作，反思教學法。在各類能力模塊中，將多媒體和網(wǎng)絡技術充分應用于教學中，培養(yǎng)學生能夠獨立設計實驗，分析問題和解決實際問題的能力。
3 建立藥學專業(yè)網(wǎng)絡教學體系
現(xiàn)代教育技術在我校藥學教育中應用所取得的成效凸顯，但多媒體教學的實踐中仍存在不足之處，需要不斷建設和完善。如學校多媒體設施投入不足，硬件環(huán)境需要改善；課件的設計流于形式，缺乏靈活性和多樣性，教師利用多媒體進行教學的整體水平有待提高。針對以上存在的問題，我們從以下三個方面逐步完善藥學專業(yè)網(wǎng)絡教學體系。
3.1 提高多媒體課件制作的針對性、實效性和系統(tǒng)性
提高多媒體課件制作的針對性是指針對學生基礎知識的實際水平和可接受的程度，根據(jù)教材相關章節(jié)的具體內(nèi)容以及課時限定的時間確定，捕捉與識別有效資源并加以利用。例如，在《藥劑學》中講解片劑的制做過程時，我們應充分利用網(wǎng)絡資源，查找壓片機的使用功能宣傳片，結(jié)合gmp車間生產(chǎn)片劑的全過程的模擬軟件，給學生直觀的感性認識，有助于學生理解藥物從原料到制成成品的全過程，使書本抽象的講解轉(zhuǎn)變?yōu)閷嶋H操作，降低了學習的難度。
提高多媒體課件制作的實效性是指在多媒體教學課件制作與運用的實踐中要適度、適量、適時，從科學性原則出發(fā)，對教學內(nèi)容的選材、例證追求典型性和代表性。不為追求美觀而違背客觀事物的真實反映。在表達方法上，采用比較、分類、歸納、分解、演示和模擬仿真等科學手段來表達豐富的教學內(nèi)容，提高課堂教學效率。將課件制作中常用的photoshop、adobe audition、imageready、3d studio max、softimage 3d等創(chuàng)作方法、技術與教師講授有機結(jié)合，以講授為主，多媒體教學為輔，注重師生互動，做到人機之間既要有合作，也要有分工，最大限度地調(diào)動學生的學習熱情，完成教學目標。
提高多媒體課件的制作系統(tǒng)性是指組建學科課件資源要做好長期規(guī)劃，一方面要遵循教學大綱相對穩(wěn)定的基本要求，以學科知識體系為綱，搭建框架，將課程內(nèi)容以模塊的形式分門別類；另一方面結(jié)合學科發(fā)展前沿，從現(xiàn)實需求入手，由點到面，逐步完善。
3.2 加強藥學類精品課程的建設
精品課程建設是“質(zhì)量工程”的重要組成部分。根據(jù)《教育部關于啟動高等學校教學質(zhì)量與教學改革工程精品課程建設工作的通知》的要求，注重使用先進的教學方法和手段和重視教材建設是精品課程建設要重點抓好的兩個方面工作。加強藥學類精品課程建設時，重點在構(gòu)建課程體系、組織教學內(nèi)容、實施創(chuàng)新與實踐教學、改革教學方法與手段等方面進行系統(tǒng)配套的改革；安排教學內(nèi)容時，要將授課、討論、作業(yè)、實驗、實踐、考核、教材等教學環(huán)節(jié)作為一個整體統(tǒng)籌考慮，充分利用現(xiàn)代化教育技術手段和教學方式，形成立體化的教學內(nèi)容體系；重視立體化教材的建設，鼓勵和推薦教師參加立體化教材的編寫，加強基礎課程教材、教學參考書、學習指導書、實驗課教材、實踐課教材、專業(yè)課程教材配套建設，加強計算機輔助教學軟件、多媒體軟件、電子教案、教學資源庫的配套建設。目前，我們已建立了《藥物化學》、《藥物分析》、《藥理學》、《生藥學》、《分析化學》、《藥劑學》、《物理化學》、《有機化學》精品課程網(wǎng)頁，其中《生藥學》和《分析化學》為廣西省精品課程。我們編寫出版的《大學化學實驗》教材，是一本立體化教材，以應用型醫(yī)藥專業(yè)學生為主要對象，含化學基本技能實驗、化學基本方法實驗、設計實驗、研究實驗四個層次，其特點為“一體化、多層次”，密切結(jié)合醫(yī)藥專業(yè)的應用需要，精選、重整、相益而彰。該教材為形成《大學實驗化學》書面教材與電子教案、電子圖書、cai、試題庫、網(wǎng)絡課程、資料庫等網(wǎng)絡出版物有機配套，構(gòu)建教學平臺，因此獲得“十一五”第一批廣西高等學校優(yōu)秀教材稱號。
目前，我們正著手開展“藥學一體化實驗教學”項目，將藥物合成、藥物制劑、藥物分析、藥理學、藥物動力學的實驗融為一體，以撲熱息痛實驗為例，從撲熱息痛的藥物合成，撲熱息痛顆粒劑的制作，到撲熱息痛顆粒劑的質(zhì)量檢測，用藥動學方法測定撲熱息痛血藥濃度計算口服給藥的參數(shù)，最后研究撲熱息痛鎮(zhèn)痛的藥理活性，使學生經(jīng)歷藥物研發(fā)全過程。綜合性、設計性實驗訓練提高了學生綜合運用各學科知識的能力，鞏固了藥學基本技能，培養(yǎng)學生的創(chuàng)新思維，讓學生成為學習的主角。
3.3 師資隊伍的建設
師資隊伍培訓是實施教育信息化工程的重中之重，是否擁有大批掌握并能應用現(xiàn)代信息技術的教師是推動教育信息化的關鍵?；诂F(xiàn)代技術的藥學教育是以計算機技術為核心的信息技術，這就要求教師不僅能夠?qū)⑵渥鳛檩o助教學的演示工具，還要能實現(xiàn)信息技術與學科教學的融合。要實現(xiàn)這種融合，就需要對教師進行現(xiàn)代信息和互聯(lián)網(wǎng)應用等多方面的培訓。學校采取送出去和請進來的方式對教師分階段、分層次進行培訓，注重提高教師使用計算機的實際操作水平，培養(yǎng)教師自己設計制作課件的能力及網(wǎng)上操作能力。學校一方面對教師進行觀念轉(zhuǎn)變，組織教師外出參觀示范課、欣賞優(yōu)質(zhì)課件；另一方面對全體教師進行計算機操作能力的全員培訓，使每位教師都能熟練地進行單機教學。同時激勵教師利用多媒體、網(wǎng)絡技術進行備課和教學，提高教學課件的質(zhì)量。在信息化教學模式下，傳統(tǒng)的教學思維逐步轉(zhuǎn)變，現(xiàn)代教育技術已漸漸融入教師的教學活動當中，逐步建立“以學生為中心”的教學觀念。
4 結(jié)語
現(xiàn)代教育技術在未來的教育中必將普及，發(fā)展和完善則是我們面臨的主要任務，無論在人力、技術，還是物力上都必須進一步增加投入，但現(xiàn)代教育技術畢竟只是教學的輔助手段，只能充分利用而不能完全依賴，只有當良好的教學基本功和豐富的現(xiàn)代教育技術完美結(jié)合時，教學水平才能不斷提高，教學質(zhì)量才能得到有效保證。
一、綜合技能訓練課程設計
1、訓練項目
在充分聽取專業(yè)建設指導委員會意見的基礎上，結(jié)合用人單位調(diào)查問卷和本專業(yè)實訓中心現(xiàn)狀，確定血糖測定、血脂測定、肝功能、腎功能、血常規(guī)、凝血檢查、尿常規(guī)、糞便常規(guī)及隱血試驗、乙型肝炎病毒5項測定、臨床常見標本的細菌學檢驗等綜合技能訓練項目。
2、實施過程
（1）課前準備
學生按3～4人劃分為一個小組，實訓前教師將實訓項目布置給學生，并提出與該項目有關的問題，例如：血常規(guī)檢驗標本的采集方法及注意事項，檢測內(nèi)容及各項檢測內(nèi)容的臨床意義等。學生根據(jù)老師提供的問題，認真閱讀教科書，利用圖書館、網(wǎng)絡資源等進行自主探究學習。
（2）技能訓練
每個綜合訓練項目由小組成員分別扮演不同的角色共同完成，整個過程模擬臨床檢驗工作流程。如綜合實訓項目“血常規(guī)檢驗”，小組成員中有的扮演患者，有的作為采血人員，有的進行檢測操作，有的負責結(jié)果分析與審核。整個技能操作嚴格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第3版）進行。如果遇到結(jié)果異常，檢驗人員要對整個過程進行回顧分析，是操作者的問題還是其他原因。在排除檢驗人員自身原因后要及時詢問患者病史，并且對患者血液進行涂片鏡檢。
（3）課后總結(jié)
每次實訓結(jié)束后，教師引導學生共同對檢驗項目的目的、原理進行闡述，并對結(jié)果進行認真分析，要讓學生知道結(jié)果的分析和總結(jié)非常重要，比如血常規(guī)中白細胞檢測結(jié)果異常可能是由細菌感染引起的，也可能是由病毒感染引起，也可能是白血病引起，這就需要學生運用所學的知識綜合分析實驗結(jié)果，不能草率地就把化驗單發(fā)放出去。教師總結(jié)完畢后由學生分組討論，總結(jié)整個操作過程中的經(jīng)驗與教訓。
3、考核方法
建立科學合理的實踐教學考核體系，對深化實驗教學改革，提高實驗教學質(zhì)量，培養(yǎng)學生實踐能力和創(chuàng)新精神具有重要的指導意義。實訓技能考核既是對學生學習效果的檢測，也是對教師授課質(zhì)量的反饋性評價。為了更好地對學生整個綜合實訓過程進行評價，邀請行業(yè)專家參與制訂各個綜合實訓項目及考核評分標準。綜合實訓課程結(jié)束后，教師對這些項目進行編號，學生抽簽確定考核項目，綜合實訓技能考核以學生動手操作為主，采用全過程評價方式，實訓成績的評判嚴格按照評分標準進行，而不是以最終的實訓結(jié)果而確定?？己瞬缓细竦耐瑢W，利用實訓室開放加強訓練，然后進行補考。
4、綜合實訓效果
綜合技能訓練提高了學生綜合運用知識的能力，畢業(yè)生質(zhì)量跟蹤調(diào)查問卷顯示，用人單位對這項改革給予了充分的肯定。
二、討論
醫(yī)學檢驗技術是一門綜合性、技術性、實踐性很強的學科，實踐是醫(yī)學檢驗得以發(fā)展和創(chuàng)新的基礎。但是，傳統(tǒng)的實驗教學多是一些驗證性、重復性的內(nèi)容，實訓項目沒有放在整門課程、整個專業(yè)要求的全局中。這種實訓教學模式，很難使學生綜合運用所學的知識去分析問題、解決問題，最終導致了理論與實踐、教學與臨床的脫節(jié)。
1、綜合技能訓練有利于提高學生綜合運用知識的能力綜合技能訓練是以檢驗程序為核心模擬臨床檢驗工作流程，訓練學生綜合運用臨床檢驗基礎、生物化學檢驗、免疫學檢驗、微生物檢驗、血液學檢驗等知識和技能，對模擬患者實施標本采集、處理、檢測及結(jié)果的審核和發(fā)放，整個過程由學生獨立完成。綜合技能訓練是學生對所學知識進行綜合運用的一次全面的強化訓練，使學生在知識和技能學習上獲得雙豐收。只有專業(yè)理論和技能并重，才能成為合格的檢驗師。
2、綜合技能訓練規(guī)范了學生的操作技能綜合技能訓練安排在醫(yī)學檢驗技術專業(yè)學生各種單項訓練完成之后，這樣能再次強化和規(guī)范學生的各項操作技術，對學生參與臨床實習起著重要的作用。
3、綜合技能訓練提高了學生的團隊協(xié)作能力在綜合實訓過程中，需要小組各個成員分工合作，團結(jié)協(xié)作，共同完成實訓的整個過程。學生在相互學習中共同提高，同時也培養(yǎng)了他們之間的團結(jié)協(xié)作精神，為今后從事臨床檢驗工作奠定了堅實的基礎。
4、綜合技能訓練有效地實現(xiàn)教學與臨床工作的對接綜合技能訓練模擬臨床檢驗工作流程，強調(diào)了知識、技能在實際工作中的綜合運用，經(jīng)過實習前的綜合訓練，學生不僅掌握了臨床檢驗基本技術，了解臨床檢驗實際工作的過程，而且加強了實踐教學與臨床實踐的緊密聯(lián)系，實現(xiàn)了教學與臨床的“零距離”對接。綜合實訓改變了學生在進入實習崗位后因進入角色慢而不受歡迎的被動局面，對學生的頂崗實習有很大的幫助。從畢業(yè)生質(zhì)量跟蹤調(diào)查問卷顯示，用人單位對我們的這項改革給予了充分的肯定。
5、綜合技能訓練對教師提出了更高的要求綜合性實驗開設過程中，對教師的整體素質(zhì)提出了更高的要求．學生會遇到比常規(guī)教學更多的問題，需要教師隨時指導，同時對實驗室人員和實驗室管理的要求也相應提高。綜合技能訓練使多門專業(yè)課程的實踐教學朝著專業(yè)一體化的方向發(fā)展，這就要求教師全面提升自己的專業(yè)知識與技能，加強各專業(yè)課程間的融匯與貫通。醫(yī)學檢驗技術發(fā)展迅猛，一成不變的教學模式和教學內(nèi)容是不能滿足當今社會需要的，因此教師需要定期到各大醫(yī)院進修，掌握最新的檢驗技術，豐富臨床經(jīng)驗，不斷提高實踐能力，避免教學與臨床脫軌。在醫(yī)學檢驗技術專業(yè)中開設綜合技能訓練對提高學生綜合運用知識，規(guī)范操作技能、提高團隊協(xié)作能力，實現(xiàn)教學與臨床工作對接方面有重要的作用，同時對教師也提出了更高的要求。
作者：代榮琴 侯振江 陳洋 劉玉枝 李紅巖 單位：滄州醫(yī)學高等?？茖W校醫(yī)學技術系檢驗教研室
1臨床醫(yī)學檢驗技術質(zhì)量管理存在的問題
1.1臨床醫(yī)學檢驗技術人員及臨床醫(yī)師之間的溝通較少
臨床醫(yī)學檢驗技術人員及臨床醫(yī)師之間的溝通較少是當前存在的主要問題。檢驗科室也包括不同的分工，有的分工需要與臨床醫(yī)師溝通。就以檢驗科技師的工作職責來說，他們不僅負責所用專業(yè)儀器設備的調(diào)試、鑒定、操作、建檔和維修保養(yǎng)，更是需要負責血液質(zhì)量檢查和儲備工作，參加發(fā)血、實驗檢測、血型鑒定、交叉配血和成分制備。而這些工作都需要與臨床醫(yī)師溝通，具體了解血型等相關問題。有這樣一些狀況，檢驗人員在檢驗工作中總是指望臨床醫(yī)師能及時跟上檢驗科推出新檢驗技術的步伐，而臨床醫(yī)師并不愿積極去嘗試，在某種程度上就容易導致不良的醫(yī)療合作關系的產(chǎn)生，從而容易出現(xiàn)醫(yī)療缺陷并引發(fā)醫(yī)療事故發(fā)生。
1.2臨床醫(yī)學檢驗技術質(zhì)量管理機制執(zhí)行力差
臨床醫(yī)學檢驗技術質(zhì)量管理機制執(zhí)行力差是存在的關鍵問題。很多醫(yī)院的檢驗科都設置了相關的質(zhì)量管理機制，這些機制對于工作人員的崗位職責及工作流程都有一定的規(guī)定。但是臨床醫(yī)學檢驗科工作人員在實際的工作運行中，并不能夠真正落實制度規(guī)定的內(nèi)容，嚴格最終質(zhì)量管理制度。比如，在相關技術人員負責對血液及成分的化驗檢查等各項技術進行檢查和監(jiān)督的過程時，需要精確記下相關的記錄，但是個別技術人員在數(shù)據(jù)記錄過程中存在著誤差。在進入實驗室的時候，制度明確規(guī)定，所有人員需要穿上工作裝，但是有個別人員不對自己進行規(guī)范，而直接進入實驗室。
1.3臨床醫(yī)學檢驗技術質(zhì)量管理的考核較少
臨床醫(yī)學檢驗技術質(zhì)量管理的考核較少是存在的重要問題。技術質(zhì)量管理的考核工作開展得好，能夠督促工作人員做好質(zhì)量管理。但是實際上，其更關注的是檢驗技術，很少會開展這方面的考核。另外，目前臨床醫(yī)學技術質(zhì)量管理考核制度也不完善，質(zhì)量管理的考核結(jié)果不與技術人員的獎金、職稱等掛鉤，都存在一定的弊端。
2解決臨床醫(yī)學檢驗技術質(zhì)量管理問題的對策
為了更好地解決臨床醫(yī)學檢驗技術質(zhì)量管理的問題，下面，筆者就從以下幾方面就其對策進行分析。
2.1培養(yǎng)臨床醫(yī)學檢驗技術質(zhì)量管理意識
培養(yǎng)臨床醫(yī)學檢驗技術質(zhì)量管理意識是解決臨床醫(yī)學檢驗技術質(zhì)量管理問題的前提和基礎。只有從主觀上意識到了臨床醫(yī)學檢驗技術質(zhì)量管理的重要，才能夠在日常的行為中做好關于質(zhì)量管理方面的工作。培養(yǎng)質(zhì)量管理意識需要從以下方面做好工作：
(1)身為相關的領導，要有意識地加強自身學習，通過從檢驗工作的本色出發(fā)，加強急救醫(yī)學、急救技術知識等相關方面的培訓。只有質(zhì)量管理意識提升了，才能夠進一步增強工作職員應對醫(yī)療突發(fā)事件的應急能力，對新知識、新測定辦法、新儀器的操作原理和步驟應實行重點培訓，增強檢驗人員的基本醫(yī)學知識。
(2)身為檢驗科工作人員，唯有質(zhì)量管理意識提升了，才能夠時刻督促自己做好工作。不僅要把技術作為工作重點，更是要重視質(zhì)量管理。
2.2加強臨床醫(yī)學檢驗技術人員與臨床醫(yī)師的溝通
加強臨床醫(yī)學檢驗技術人員與臨床醫(yī)師的溝通是解決臨床醫(yī)學檢驗技術質(zhì)量管理問題的重要措施。檢驗科的工作與臨床科室有著較為密切的聯(lián)系，因此，檢驗科工作人員要進一步加強和其他臨床科室的溝通，熟悉不同疾病的試驗室查看本色和疾病的診斷標準，理解臨床常見病例和高發(fā)病例的相關醫(yī)學知識，進一步積累臨床工作經(jīng)驗，提升專業(yè)技能水平。從臨床醫(yī)學的角度來看，檢驗科的重要工作就是為臨床一線醫(yī)生提供里相關的檢驗數(shù)據(jù)，能夠進一步為決定診斷、判定療效、查明病因、施行臨床醫(yī)學研究等提供參考。為此，臨床科室醫(yī)生們的意見就成為檢驗科檢驗人員改進工作的關鍵，強化與臨床醫(yī)師的溝通。
2.3加強臨床醫(yī)學檢驗技術質(zhì)量管理機制的執(zhí)行力
一般來說，檢驗科需要建立和完善醫(yī)療質(zhì)量管理體系和檢驗技術質(zhì)量保證機制。在今后的工作中，檢驗科工作人員要嚴格按照規(guī)章制度行事，管理小組要嚴格按照醫(yī)院醫(yī)療質(zhì)量管理制度對檢驗人員工作的質(zhì)量進行監(jiān)控，確保檢驗工作標準化、流程化、質(zhì)量化。比如，對于儀器的設備和維護就要嚴格按照制度來做，在使用儀器前，對儀器進行認真檢查，確保不出現(xiàn)問題。在儀器使命之后，對儀器進行維護，把試驗中的儀器誤差值盡量降到最低。
2.4加強臨床醫(yī)學檢驗技術的考核
加強臨床醫(yī)學檢驗技術的考核能督促檢驗科工作人員做好工作，最好是將考核的結(jié)果與其待遇、職稱等掛鉤，真正讓他們能夠重視質(zhì)量管理，并全身心投入其中。需要進一步加強對檢驗科的具體管理，不定期地對檢驗科人員進行檢驗技術質(zhì)量的考核和監(jiān)督。需要注意的是，要注意到整個檢驗過程中檢驗技術質(zhì)量的考核。
綜上所述，臨床醫(yī)學檢驗技術質(zhì)量管理是檢驗科的重要工作，筆者就結(jié)合自身的工作經(jīng)驗，從培養(yǎng)臨床醫(yī)學檢驗技術質(zhì)量管理意識、加強臨床醫(yī)學檢驗技術人員與臨床醫(yī)師的溝通、加強臨床醫(yī)學檢驗技術質(zhì)量管理機制的執(zhí)行力及加強臨床醫(yī)學檢驗技術的考核等方面進行介紹。在今后的工作中，要進一步做好臨床醫(yī)學檢驗技術質(zhì)量管理工作，確保檢驗科工作順利開展。
作者：王瑛 單位：南縣婦幼保健院
1醫(yī)學檢驗臨床技術的提高
1.1臨床醫(yī)學檢驗技術現(xiàn)狀分析。
現(xiàn)代臨床醫(yī)學檢驗技術的發(fā)展中多學科滲透、配合，以完成臨床醫(yī)學診斷對檢驗工作的要求。作為一項綜合性應用學科，任何單項學科的技術發(fā)展都對檢驗工作有著極大的促進作用。化學、物理學、光學、生物學等學科中，現(xiàn)代科技的應用為臨床檢驗技術的發(fā)展提供了堅實的基礎支持，也使得臨床醫(yī)學檢驗技術成為了現(xiàn)代醫(yī)學領域發(fā)展最快的學科。目前，臨床醫(yī)學檢驗不僅應用于臨床的診療，同時還在衛(wèi)生預防、保健、康復等活動中有著重要的應用。目前，我國臨床醫(yī)學檢驗工作在機構(gòu)設置、規(guī)模建設、普及率以及技術應用等方面都有了質(zhì)的飛躍，臨床檢驗科室成為了醫(yī)院機構(gòu)的基本構(gòu)成單位。針對臨床醫(yī)學檢驗需求，應首先了解臨床檢驗技術應用需求。在此基礎上加強技術控制與管理、強化臨床檢驗科室的管理、強化檢驗質(zhì)量的控制與評測、強化新技術應用評價等工作。
1.2臨床醫(yī)學檢驗技術應用問題分析。
目前，我國臨床醫(yī)學檢驗技術應用中，多以檢測技術規(guī)范為基礎開展臨床檢測工作，但是由于缺乏統(tǒng)一的標準化管理，實驗室設置、儀器標準化配置、制劑管理以及科室管理等仍存在需要改進的地方。另外，新技術應用過程中對臨床檢驗人員的專業(yè)知識、學習能力等也提出了新的要求。這些都需要現(xiàn)代醫(yī)療結(jié)構(gòu)針對臨床醫(yī)學檢驗技術發(fā)展及應用情況進行完善，通過問題的發(fā)現(xiàn)、解決方法的提出、解決方法的應用以及效果評價等工作促進臨床檢驗事業(yè)的發(fā)展、促進臨床醫(yī)學檢驗技術的發(fā)展。
1.3鼓勵醫(yī)學檢驗設備企業(yè)發(fā)展，促進醫(yī)學檢驗臨床技術的提高。
在現(xiàn)代臨床醫(yī)學檢驗技術發(fā)展中，臨床醫(yī)學檢驗設備的發(fā)展具有重要的推動意義。因此，加強對醫(yī)學檢驗設備企業(yè)的扶持、鼓勵醫(yī)學檢驗設備發(fā)展，能夠促進醫(yī)學檢驗設施生產(chǎn)企業(yè)經(jīng)濟效益的提升。通過政策扶持、利稅扶持等，使醫(yī)學檢驗生產(chǎn)企業(yè)能夠提高綜合市場競爭力，進而使設備生產(chǎn)企業(yè)具有更強的實力進行設備研發(fā)，以此促進醫(yī)學臨床檢驗技術的發(fā)展、促進我國臨床醫(yī)學檢驗事業(yè)的發(fā)展。
1.4以臨床醫(yī)學檢驗科室管理為基礎，促進臨床醫(yī)學檢驗技術的應用。
為了促進臨床醫(yī)學檢驗技術的應用，鼓勵臨床醫(yī)學檢驗技術的發(fā)展，我國醫(yī)療管理部門應在傳統(tǒng)檢驗規(guī)范基礎上，加強統(tǒng)一標準的出臺。以統(tǒng)一的規(guī)范、標準指導臨床醫(yī)學檢驗科室的建設與管理，以此保障臨床醫(yī)學檢驗工作質(zhì)量。同時，通過對人員素質(zhì)的考核規(guī)定、人員在職學習規(guī)定等硬性標準的，保持臨床醫(yī)學檢驗工作人員的專業(yè)知識水平及先進性，促進臨床醫(yī)學檢驗技術的應用。針對現(xiàn)代臨床醫(yī)學檢驗技術的發(fā)展，新技術應用及新設備應用中還應加強與設備廠家的溝通。針對新設備、新技術應用中可能存在的問題制定應對預案，保障臨床醫(yī)學檢驗新技術應用的基礎。
1.5加快臨床醫(yī)學檢驗成果的轉(zhuǎn)化，促進臨床醫(yī)學檢驗技術的發(fā)展。
在臨床醫(yī)學檢驗技術發(fā)展中，各大院校及科研機構(gòu)是臨床醫(yī)學檢驗技術發(fā)展的重要動力。但是，受市場經(jīng)濟因素影響，許多臨床醫(yī)學檢驗技術的研究成果并未實現(xiàn)產(chǎn)品化。這在很大程度上影響了我國臨床醫(yī)學檢驗事業(yè)的發(fā)展，影響了臨床醫(yī)學檢驗技術的發(fā)展。針對這一問題，現(xiàn)代科研機構(gòu)及各大院校應加強成果的宣傳與轉(zhuǎn)化。針對一部分企業(yè)缺乏專利、成果轉(zhuǎn)讓費用的情況，研究機構(gòu)可以采取技術入股等形式進行科研成果的轉(zhuǎn)化。通過技術入股降低科研成果轉(zhuǎn)讓門檻、同時開拓院校、科研機構(gòu)研究經(jīng)費來源，促進研究工作的進一步開展。
2以經(jīng)驗交流為重點，促進臨床醫(yī)學檢驗技術的發(fā)展
臨床檢驗人員是臨床醫(yī)學檢驗技術應用的一線人員，他們對臨床醫(yī)學檢驗技術實際應用中存在的問題、解決措施及發(fā)展方向有著極大的發(fā)言權。但是，在目前的臨床醫(yī)學檢驗技術研發(fā)中，由于缺乏這類人員的參與，導致了許多技術實際應用操作性不強、時效性不強等問題。因此，我國臨床醫(yī)學檢驗技術研發(fā)單位應在臨床醫(yī)學檢驗技術研究中，加強與一線檢驗人員的經(jīng)驗交流和技術交流。通過交流活動使技術研究人員了解檢驗技術的實際應用情況，以此為基礎提高臨床醫(yī)學檢驗設備操作的便捷性。同時針對臨床醫(yī)學檢驗工作快速檢驗的需求，加強研究工作中檢驗時效性的應用，提高臨床醫(yī)學檢驗新技術的發(fā)展水平。
3結(jié)論
綜上所述，現(xiàn)代臨床醫(yī)學檢驗技術的發(fā)展對提高臨床診療效率、提高臨床診斷準確性有著重要的意義。隨著我國醫(yī)療體系的健全、醫(yī)療工作開展中對臨床醫(yī)學檢驗工作的需求，我國臨床醫(yī)學檢驗科研機構(gòu)以及儀器設備生產(chǎn)企業(yè)應加快研發(fā)腳步。以自主知識產(chǎn)權為基礎，提高我國臨床醫(yī)學檢驗技術水平，促進臨床醫(yī)學檢驗事業(yè)的發(fā)展。
作者：徐平 王林濤 單位：山東省平度市田莊鎮(zhèn)衛(wèi)生院
一、醫(yī)學檢驗技術專業(yè)發(fā)展趨勢
醫(yī)學檢驗是一門綜合性的邊緣學科。因此，有必要建立其自身的理論發(fā)展體系，重點研究自動化技術、形態(tài)學檢驗技能、生物安全操作技術。醫(yī)學檢驗技術的發(fā)展，特別是檢驗儀器的迅速發(fā)展，使生化、臨床、免疫和微生物檢驗中的部分項目已實現(xiàn)了全自動或半自動化。一些新型檢驗技術（如生化檢驗中的酶促速率法分析技術，臨床檢驗中的干化學試紙條法檢測，免疫檢驗中的放射免疫，酶免疫及化學發(fā)光，微生物檢驗中的全自動鑒定技術和以聚合酶鏈反應為代表的分子生物學新技術）使檢測方法的靈敏度不斷提高，特異性增強，檢測結(jié)果更加準確可靠。檢驗技術裝備日趨專業(yè)化、精密化，檢測項目逐步增多，使臨床疾病的診斷對醫(yī)學檢驗項目的依賴愈加明顯。臨床檢驗已由單純的輔助性技術工作變成直接參與臨床診斷、科研和醫(yī)療決策的手段，對疾病的診斷、治療監(jiān)測和預后評估都起著越來越重要的作用。自動化儀器檢驗雖具有速度快、重復性好、干擾因素小、可批量測定、便于室內(nèi)質(zhì)控和評價等特點，是醫(yī)學檢驗技術發(fā)展的主流，但其忽略了標本的形態(tài)學觀察，漏檢、誤診時有發(fā)生。實踐證明，無論儀器多么精確、多么自動化，也不能完全取代具有諸多形態(tài)學成分的顯微鏡檢驗，因為它不可能有完全的思維鑒別能力。因此，形態(tài)檢驗技能是醫(yī)學檢驗人員必備的技能和“真功夫”，是任何儀器設備都無法替代的，學校應注重醫(yī)學檢驗技術專業(yè)學生此項技能的培訓。
二、我校醫(yī)學檢驗技術專業(yè)教學情況及存在的主要問題
我校醫(yī)學檢驗技術專業(yè)創(chuàng)辦已有56年，是學校的重點專業(yè)，有一定的辦學基礎和辦學經(jīng)驗，為各地醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)輸送了大量的醫(yī)學檢驗人才。近年來學校在重點專業(yè)建設和示范校建設中陸續(xù)購入了一批先進的實驗儀器設備，使醫(yī)學檢驗技術專業(yè)辦學水平有了進一步的提升，在師資隊伍結(jié)構(gòu)和課程設置、校內(nèi)外實訓基地建設、教學方法和手段等方面都取得了一定的成績，但部分教學仍采用傳統(tǒng)教學模式，沒有徹底轉(zhuǎn)變專業(yè)課程開發(fā)理念，表現(xiàn)在僅從醫(yī)學檢驗崗位工作任務出發(fā)，課程設置與工作實際、就業(yè)崗位技能要求聯(lián)系不緊密等方面。另外，出于學校教學經(jīng)費和成本的考慮，壓縮了學校實踐教學及臨床見習的課時，理論教學過多，實踐教學課時相對偏少，檢驗職業(yè)崗位能力在教學中未得到充分重視。同時，還存在部分專業(yè)核心課程師資匱乏、教學內(nèi)容與臨床實際脫節(jié)、學生接觸臨床較晚、適應性有待提高等方面的問題。
三、中職醫(yī)學檢驗技術專業(yè)教學改革
1人才培養(yǎng)模式改革
為適應醫(yī)學檢驗行業(yè)飛速發(fā)展和檢驗醫(yī)學分工細化的發(fā)展趨勢，醫(yī)學檢驗人才培養(yǎng)模式改革勢在必行，醫(yī)學檢驗技術專業(yè)培養(yǎng)目標有待進一步明確，人才培養(yǎng)模式應充分體現(xiàn)中職醫(yī)學檢驗技術專業(yè)特色。學校應重點培養(yǎng)學生的實驗操作技能，使學生適應實驗儀器操作、血液標本采集、實驗室質(zhì)量控制和常用試劑配制的崗位需求，具備自動化和微機化實驗儀器設備操作維護方面的知識，成為醫(yī)學檢驗行業(yè)技術熟練的人才。
2專業(yè)課程設置與課程標準改革
按照教育部的有關規(guī)定，中職學校應以能力為本位，突出應用性、實踐性，科學地建立課程體系。（1）以就業(yè)為導向、以職業(yè)能力為依據(jù)，構(gòu)建理論知識以“必需、夠用”為原則，基礎理論以“應用”為目的，圍繞應用能力和職業(yè)基本素養(yǎng)培養(yǎng)，強化綜合能力的課程體系。醫(yī)學檢驗技術專業(yè)學生在校初期突出醫(yī)用化學和計算機應用基本知識、基本技能的學習，掌握基礎醫(yī)學和臨床醫(yī)學的基本理論知識和臨床疾病診療基本知識。（2）在專業(yè)理論學習方面，根據(jù)本專業(yè)職業(yè)崗位群所需知識、能力結(jié)構(gòu)的基本要求，按職業(yè)導向、項目引領，刪去陳舊內(nèi)容，重新整合教學內(nèi)容，并在原有課程體系中增設與地域職業(yè)特點和職業(yè)崗位需求相關的課程，如艾滋病護理及職業(yè)防護、醫(yī)學統(tǒng)計方法等。（3）在實踐教學方面，以全面提高學生動手能力和綜合分析、解決問題的能力為目標，對各門核心課程內(nèi)容進行篩選，刪除陳舊和重復內(nèi)容，按職業(yè)導向設置實踐教學課程，按職業(yè)崗位工作流程設計綜合實驗及仿真實訓，使學生學習在未來職業(yè)崗位，工作在學習環(huán)境，真正實現(xiàn)教、學、做一體化和理論與實踐的零距離。實行早期臨床見習，著重培養(yǎng)學生適應醫(yī)學檢驗技術專業(yè)及相關領域職業(yè)崗位所需的技能。
3專業(yè)教學改革
3.1教學理念的更新與教學模式的探索
以就業(yè)為導向、崗位能力為引領的任務驅(qū)動式教學模式將成為現(xiàn)代職業(yè)教育教學體系的核心。圍繞這個核心，我校的做法是：第一學年以培養(yǎng)職業(yè)人文素質(zhì)為主，第二學年以培養(yǎng)崗位核心技能為主，第三學年以培養(yǎng)崗位綜合能力為主，循序漸進推進，通過校內(nèi)外實訓基地的認知性實踐、模擬和真實崗位實訓及頂崗實習，培養(yǎng)學生的職業(yè)崗位技能，提高專業(yè)理論水平和實踐教學質(zhì)量。
3.2教學方法的創(chuàng)新隨著教學改革不斷深入，改革和創(chuàng)新
教學方法以適應職業(yè)導向、項目引領、任務驅(qū)動的課程教學模式勢在必行，減少純理論教學，改革實驗教學方法，減少演示性、驗證性實驗，加強實際操作訓練；聘請行業(yè)專家承擔一定教學任務，共同參與教學探索與實施，采用多種教學方法，如立體式多媒體教學、項目式教學、互動式教學、案例分析式教學、情景式教學、知識競賽式教學、討論式教學等，通過設置一個項目或工作任務提高學生分析和解決問題的能力，讓學生參與試劑配制、實驗器材準備、預實驗等，課余時間開放實驗室，并配備專業(yè)實訓教師輔導，讓學生有更多的時間參加操作能力訓練，使教學緊密聯(lián)系臨床而又生動有趣。
3.3考試及評價模式的改變
考試是教學活動的重要組成部分，是檢查教學質(zhì)量的重要手段，是評價學生學習，檢查教師教學情況、教學水平以及評估教學效果的主要依據(jù)。為加強教學管理，提高教學質(zhì)量，對學生職業(yè)能力的評價，除學校評價外，還應增加用人單位和社會評價。
3.4編寫理實一體化的校本教材
對三年制中職醫(yī)學檢驗技術專業(yè)學生而言，要在兩年學校學習期間掌握扎實的專業(yè)基礎、專業(yè)理論知識和基本的專業(yè)操作技能，學校就必須充分發(fā)揮教、學、做一體化的作用，對各核心課程內(nèi)容進行整合，編寫具有中職醫(yī)學檢驗技術專業(yè)特色的綜合技能實訓校本教材。這樣可使核心課程專業(yè)技能相互銜接，達到強化專業(yè)技能、縮短適應臨床職業(yè)崗位時間的目的。
3.5專業(yè)師資隊伍建設
職業(yè)教育對教師提出了更高的要求，師資隊伍建設要適應專業(yè)人才培養(yǎng)模式改變的需要，按照職業(yè)崗位要求，教師不僅應具備扎實的理論知識，還應具有豐富的實際工作經(jīng)驗。因此，專業(yè)教師應充實理論知識，定期參與臨床實踐，了解一線工作情況，積累實際工作經(jīng)驗，提出研究、解決問題的方法；加強專兼職教師隊伍建設，聘請行業(yè)專家或有豐富經(jīng)驗的專業(yè)技術人員作為兼職教師，承擔部分核心課程的理論、實踐和現(xiàn)場教學，實現(xiàn)專兼職教師教學的相互交叉、融合；通過“走出去、請進來”的雙通道途徑，培養(yǎng)“雙師型”教師，改善師資結(jié)構(gòu)，解決部分專業(yè)核心課程師資匱乏的現(xiàn)實問題。制定相應的政策和辦法，加強專業(yè)帶頭人和骨干教師的培養(yǎng)。
4專業(yè)實訓基地建設改革
醫(yī)學檢驗技術專業(yè)教學，需要有良好的實驗實訓條件和先進的檢驗儀器設備，但學校的辦學經(jīng)費有限，無法及時更新臨床實驗室，所以可走校企合作的辦學模式。一方面，接受各醫(yī)院因為更新?lián)Q代而贈送給學校的檢驗儀器設備，一些大型儀器設備可以與醫(yī)院資源共享；另一方面，加強校內(nèi)實訓基地仿真環(huán)境的建設和對外開放，讓學生有更多練習實踐技能的機會，又可發(fā)揮校內(nèi)實訓基地的社會服務功能，作為當?shù)鼗鶎俞t(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)檢驗人員的培訓基地。
5學生職業(yè)素質(zhì)培養(yǎng)改革
從上世紀80年代起,一些醫(yī)科大學相繼開設了醫(yī)學檢驗技術專業(yè),目前二甲以上醫(yī)院及相關行業(yè)的檢驗科室普遍接受的是醫(yī)學檢驗技術專業(yè)畢業(yè)的研究生、本科生和高職高專生，這使得中職生面臨巨大的就業(yè)壓力，為此，中等職業(yè)教育應從學生素質(zhì)教育入手，加強學生人文素養(yǎng)和心理素質(zhì)培養(yǎng)，開設職業(yè)生涯規(guī)劃和就業(yè)指導課程，幫助學生面對現(xiàn)實，樹立正確的擇業(yè)觀，提高學生的就業(yè)技巧，增強學生的綜合素質(zhì)和職業(yè)崗位能力。
本文作者：葛娟 單位：伊寧衛(wèi)生學校
本文作者：?？∽?單位：河南護理職業(yè)學院
1虛擬現(xiàn)實技術概況
虛擬現(xiàn)實（VirtualReality,簡稱VR）,又稱臨境技術,是指利用三維圖形生成技術、傳感交互技術以及高分辨率顯示技術,生成三維逼真的虛擬環(huán)境[1]。通俗地講,虛擬現(xiàn)實就是一種人與通過計算機生成的虛擬環(huán)境可自然交互的人機界面。虛擬現(xiàn)實技術起源于美國,目前以風行于軍事訓練、娛樂、醫(yī)學、教育、建筑等各個行業(yè)。虛擬現(xiàn)實技術的理論基礎是建構(gòu)主義和人本主義學習理論。教育是一個傳授知識的過程,通過學習者的親身經(jīng)歷可以加速這一過程并且鞏固所傳授的知識,虛擬現(xiàn)實技術是為此而設計的很多方法中最有效的。虛擬現(xiàn)實技術具有不可替代的且令人鼓舞的應用前景,因為它允許學生與現(xiàn)有的各種信息互動,在仿真過程中,學生可以經(jīng)歷不同的時間和空間、可以接觸各種仿真物體以及接觸虛擬境界的各個部分。虛擬現(xiàn)實技術具有感知性、交互性、構(gòu)想性等特點,認真分析臨床醫(yī)學教學中遇到的問題和虛擬現(xiàn)實技術的契合點,必將為臨床醫(yī)學教育帶來新的生命力。
2目前臨床醫(yī)學教育中存在的問題
2.1臨床實踐與醫(yī)學倫理之間的矛盾
眾所周知,臨床操作中有部分是具有侵入性的,對病人來說,可能會有創(chuàng)傷性和危險性。假如醫(yī)學生的技能操作尚不規(guī)范和熟練,讓其直接施行操作,很有可能將對病人構(gòu)成傷害,甚至危及他們的生命,這有悖于醫(yī)學倫理。其次,學生多組見習,如果反復檢查同一名患者,必然會造成患者的不合作,從愛傷觀念和人道主義觀念出發(fā),需要有新的教學方法來代替以真人為對象的臨床實踐教學。
2.2臨床技能實踐與資源短缺的矛盾
臨床醫(yī)學是一門實踐性、規(guī)范性、直觀性較強的學科,實踐教學部分不可或缺。隨著近年來高校的擴招,院校有限的實驗設備、實驗儀器、實習床位等資源不能很好地滿足臨床醫(yī)學生的實踐需求,師資力量和實驗室的運行能力也面臨著很大的考驗。
2.3醫(yī)療風險與帶教教師積極性的矛盾
隨著社會法制觀念的普及,社會醫(yī)療需求的增加,醫(yī)患糾紛日益增加,在對醫(yī)師尚沒有相對科學和公正的法律保護的情況下,要指導醫(yī)學生在病人身上進行臨床技能訓練,臨床帶教老師往往要冒著極高的風險,有些帶教醫(yī)師基于自我保護意識,經(jīng)常避重就輕,躲避帶教。這對提高臨床技能教學質(zhì)量極為不利。
3虛擬現(xiàn)實技術在臨床醫(yī)學教學中的優(yōu)勢
首先,虛擬現(xiàn)實技術在臨床醫(yī)學教學中的應用,既可避免臨床醫(yī)學實踐教學對患者的健康造成影響,又可使學生在虛擬的教學環(huán)境中以及模擬患者的病情變化中學習醫(yī)學知識和相關的操作技能,以便在真實的臨床醫(yī)學實踐中實現(xiàn)學有所用,不僅使臨床醫(yī)學實踐教學的順利進行得到保障,還可以較高地保證教學質(zhì)量。
其次,虛擬現(xiàn)實技術提供的無損耗實踐環(huán)境可以模擬實驗、實習的全部過程,改變了傳統(tǒng)的教師演示、學生練習的教學模式。學生可在不占用實驗室資源的情況下,掌握實驗的操作流程,這樣就很大程度地節(jié)約了實驗室資源,有效緩解供需矛盾。
最后,虛擬現(xiàn)實技術可以使醫(yī)學生在接觸臨床之前就提前進入虛擬的臨床氛圍,在虛擬環(huán)境中進行模擬操作,掌握必備的基礎知識理論,可以使其動手能力得到鍛煉,進而避免在接觸真實臨床環(huán)境時出現(xiàn)手忙腳亂的狀態(tài),防止造成安全隱患。
4虛擬現(xiàn)實技術在臨床醫(yī)學教育中的具體應用
4.1虛擬人體
美國國立醫(yī)學圖書館（NLM）早在1985年,就開始進行人體解剖圖像數(shù)字化的研究,美國科羅拉多州立大學醫(yī)學院將一具女性尸體和一具男性尸體分別作了1mm和0.33mm間距的CT和MR掃描,然后將尸體冰凍后切成1mm的薄片并照相,經(jīng)圖像重建生成冠狀面和矢狀面映像,所得圖像數(shù)據(jù)經(jīng)壓縮后,建立了“可視人”,并出版發(fā)行了CD盤片[2]。學生可在計算機屏幕上對“可視人”進行矢狀面和冠狀面的解剖,并且可以縮放局部圖像。這一項研究應用對解剖學的教學有著非同尋常的意義。汕頭大學醫(yī)學院于2002年9月引進挪威的綜合模擬人（SimMan）,主要用于臨床技能教學和考核[3]。首都醫(yī)科大學于2004年引進了美國的HPS和智能型高級綜合數(shù)字模擬人,率先在國內(nèi)開展基于VR的急診醫(yī)學高仿真模擬教學[4]。學生的診治操作由計算機評判“,病人”的狀況隨時改變——或惡化或好轉(zhuǎn),學生在此過程中可獲得真實的臨床操作體驗。此外,虛擬人體可開展虛擬解剖學、虛擬內(nèi)窺鏡學等學科的計算機輔助教學。
4.2虛擬實驗室
虛擬實驗室是在計算機加上一組軟件和相關的硬件,讓使用者在操作這臺計算機時就像在操作一臺實驗儀器一樣。很多臨床醫(yī)學教育中的實驗都可以在虛擬實驗室中開展進行。在“實驗室”里,學生有充分的實驗自主權,可以仿真實現(xiàn)各種實際中甚至不可視、不可入、不可摸、危險性高的實驗,擴寬了教學實驗的時間與空間的限制,學生甚至可以“全天候”地開展實驗,降低了實驗教學對客觀物質(zhì)條件的依賴。虛擬實驗室的硬件用來解決信號的輸入和輸出問題,軟件更為關鍵,它能很方便地改變、增減系統(tǒng)的功能與規(guī)模,美國加利福尼亞大學科爾曼實驗室開發(fā)的EXP軟件,就是一個用于神經(jīng)生理學虛擬實驗的基于虛擬現(xiàn)實的多功能軟件。應用虛擬現(xiàn)實技術的培訓模型是一種較新穎的教學方法,不僅為醫(yī)學生提供了在校早期接觸臨床的機會和條件,而且還能使其臨床技能操作能力和綜合診斷思維能力得到提高,有效激發(fā)學生們的學習熱情和潛力,較快地掌握臨床診療實踐規(guī)律,最后,還有助于學生的職業(yè)道德及行為規(guī)范的養(yǎng)成。
近幾年,在醫(yī)學教育中,虛擬現(xiàn)實技術的作用顯得越來越重要,尤其體現(xiàn)在提高病人的安全性、培養(yǎng)學生的專業(yè)操作技能與自信、教育規(guī)范化等方面凸顯了巨大優(yōu)勢。虛擬現(xiàn)實技術不僅可以提高醫(yī)學教學水平,還有助于做到客觀化考核,但是,它永遠不可能取代真正的臨床實踐,它只是醫(yī)學生接觸真實病人之前的過渡性培訓。我們應該適當?shù)匕烟摂M現(xiàn)實技術和其它教育模式有機結(jié)合起來,提高醫(yī)學專業(yè)課課堂的教學效率。
本文作者：蘭海云 汪愛勤 尹文 單位：第四軍醫(yī)大學基礎醫(yī)學部 第四軍醫(yī)大學基礎醫(yī)學部 第四軍醫(yī)大學中心實驗室
在體成像技術的發(fā)展及成像策略的不斷提高，能夠在活的生物體內(nèi)揭示細胞和分子水平的諸多細微變化，有助于在生物整體、真實的體內(nèi)環(huán)境中高時間分辨率地研究生命過程。針對某一生物過程的帶有光學標記的報告基因已被廣泛應用于細胞生物學的研究，近年來正被更多地用于在活的動物模型中探究人體內(nèi)生理機能和疾病的生物學過程。利用熒光蛋白、螢光素酶基因等生物材料標記細胞、病原體和基因，早已被證實是一種在體內(nèi)設置“檢測器”、體外直觀檢測的非?？尚械牟呗訹1]。
1在體生物發(fā)光成像技術的原理
通過生物技術將構(gòu)建的以螢光素酶基因作為標記基因的載體（重組原核表達質(zhì)粒、重組真核表達質(zhì)?；蛑亟M病毒），經(jīng)轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)染或感染并篩選得到重組病原菌、細胞（如免疫細胞、腫瘤細胞、胚胎干細胞等）或重組病毒（如腺病毒、慢病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒等）用于轉(zhuǎn)入小動物；或是將含螢光素酶及調(diào)控序列的載體線性化后經(jīng)顯微注射等技術穩(wěn)定整合于小動物基因組制備轉(zhuǎn)基因動物[2－4]。標記基因的表達可通過多種調(diào)控元件進行調(diào)控，如靶基因的啟動子和增強子等；標記的方法因研究領域、研究目的和實驗策略的不同而各異[4]，但最終都是在體內(nèi)組織如血液、肝臟、腦、脾、腎等靶部位因特定生物過程的發(fā)生而伴隨產(chǎn)生有酶活性的螢光素酶。在注入底物即螢光素的條件下，螢光素酶催化底物反應產(chǎn)生特定波長的光信號，通過成像系統(tǒng)可以直觀檢測到光信號的產(chǎn)生及變化，實時反映體內(nèi)發(fā)生的生物過程，如基因的調(diào)控表達、信號傳導、蛋白質(zhì)之間的相互作用、細胞增殖與分化等。因此，在體生物發(fā)光成像技術可廣泛應用于分子生物學、細胞生物學、病毒學與免疫學、腫瘤學等研究領域[5－8]。
2在體生物發(fā)光成像技術的應用
2．1標記于腫瘤細胞、免疫細胞、胚胎干細胞等，轉(zhuǎn)入體內(nèi)后進行成像
螢光素酶基因作為一種報告基因，最初應用于體外培養(yǎng)細胞內(nèi)目的基因的表達研究。在體生物發(fā)光成像技術的發(fā)展，使其能夠應用于在體組織細胞的表達研究[9]。螢光素酶是一類生物發(fā)光酶，1種細胞可同時被2種具有不同底物的螢光素酶標記。例如其一可由一組成性穩(wěn)定表達的啟動子驅(qū)動，作為內(nèi)參，反應細胞數(shù)量的變化；另一螢光素酶由要研究的組織特異性啟動子驅(qū)動，其發(fā)光信號的變化，在消除細胞數(shù)量變化的影響后就可反映特定的啟動子在動物體內(nèi)的表達活性[10－11]。
2．1．1腫瘤及抗腫瘤研究在體生物發(fā)光成像技術可直接實時地監(jiān)測各種癌癥模型中腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移，并可對癌癥治療中癌細胞的變化進行實時觀測和評估，能夠無創(chuàng)傷地定量檢測小鼠整體的原位瘤、轉(zhuǎn)移瘤及自發(fā)瘤。Klerk等[12]研究證實了利用此技術測量腫瘤負荷具有很高的可靠性。Minn等[13]應用該技術進行了乳腺癌肺轉(zhuǎn)移相關基因的研究，他們構(gòu)建能夠表達熒光蛋白、螢光素酶的反轉(zhuǎn)錄病毒載體，并穩(wěn)定轉(zhuǎn)染已獲得的不同亞群腫瘤細胞，先通過熒光激活細胞分選術篩選同一亞群內(nèi)具有相同轉(zhuǎn)染效果（穩(wěn)定表達外源蛋白即熒光蛋白和螢光素酶，且水平一致）的細胞，并尾靜脈注射免疫缺陷小鼠，通過檢測生物發(fā)光的部位和大小，評價不同亞群腫瘤細胞向肺部位的轉(zhuǎn)移情況及其轉(zhuǎn)移能力，再通過檢測細胞內(nèi)各基因的表達差異來分析肺轉(zhuǎn)移相關基因。Gupta等[15－16]又用相似的方法來研究乳腺癌腦轉(zhuǎn)移相關基因及乳腺癌肺轉(zhuǎn)移過程中分化基因介導的腫瘤再起始，結(jié)果再次顯示了生物發(fā)光成像技術應用于腫瘤及癌轉(zhuǎn)移機理研究領域的優(yōu)越性。
2．1．2抗腫瘤免疫及腫瘤細胞疫苗的研究用帶有生物發(fā)光標記基因的小鼠淋巴細胞或基因修飾的腫瘤細胞疫苗，可以檢測放射及化學藥物治療的效果，并可尋找在腫瘤骨髓轉(zhuǎn)移及抗腫瘤免疫治療中復雜的細胞機制。Cayeux等[17]用螢光素酶基因標記基因修飾的腫瘤細胞疫苗來免疫小鼠，而用另一種底物不同于前者的5，6－carboxy－succinimidyl－fluorescein標記該小鼠內(nèi)一種與腫瘤相關的免疫細胞，通過2種不同的標記研究了基因修飾的腫瘤細胞疫苗免疫小鼠后抗原遞呈、免疫細胞之間的相互作用及不同免疫細胞在體內(nèi)免疫過程中的作用。
2．1．3藥物促腫瘤細胞凋亡的研究當螢光素酶與抑制多肽以融合蛋白形式在哺乳動物細胞中表達，產(chǎn)生的融合蛋白無螢光素酶活性，細胞不能發(fā)光，而當細胞發(fā)生凋亡時，活化的caspase－3在特異識別位點切去抑制多肽，螢光素酶活性得到恢復，由此可用于觀察活體動物體內(nèi)的細胞凋亡相關事件。細胞凋亡時被激活的caspase－3／7與DEVD－氨基螢光素（aminoluciferin）特異結(jié)合而被酶解為氨基螢光素，它可被螢光素酶識別而產(chǎn)生生物發(fā)光信號。Liu、Hickson等[18－19]利用這一現(xiàn)象設計的細胞凋亡檢測方法均能夠以極低的DEVD－氨基螢光素量獲得較強的發(fā)光強度，因而這一方法可用于評價TNFα（α腫瘤壞死因子）、FasL、TRAIL（TNF相關促凋亡配體）等因素針對腫瘤的治療效果。
2．1．4胚胎干細胞及再生醫(yī)學的研究胚胎干細胞在再生醫(yī)學領域極具應用前景，然而注入活機體的胚胎干細胞及其分化細胞尚存在顯著的細胞死亡、畸胎瘤的形成、宿主免疫排斥反應等障礙。應用在體生物發(fā)光成像技術，可對胚胎干細胞本身及其在注入機體后的存活、增殖、分化等生物事件的發(fā)生機理進行深入研究，從而使上述諸多問題得以解決[20]。
2．2標記病原微生物，用于研究感染致病機制、轉(zhuǎn)移途徑及宿主免疫反應等
在感染性疾病的研究中，在體生物發(fā)光成像技術的應用，不僅可以提供疾病進程中觀測病原體在動物體內(nèi)的寄居部位、數(shù)量變化及對外界因素的反應等實時變化信息，而且更有助于揭示感染體內(nèi)病原體逃逸宿主防御的機制[21]。對病原體感染過程非侵入性的檢測能夠?qū)膊∵M程實時地提供新的信息，且有可能發(fā)現(xiàn)新的感染位點[22]。Lucker等[23－26］以螢光素酶基因標記HSV－1（單純皰疹病毒）并分別侵染Ⅰ類干擾素受體缺失、Ⅱ類干擾素受體缺失、Ⅰ和Ⅱ類干擾素受體均缺失的小鼠，可觀察到HSV－1對不同干擾素受體缺失小鼠的肝臟、肺、脾、淋巴結(jié)的侵襲，及病毒從血液系統(tǒng)進入神經(jīng)系統(tǒng)的過程，從而證實了不同干擾素在HSV－1感染中所起的不同的作用。Lucker等[27]針對痘苗病毒的類似研究也證實，不同干擾素在機體感染過程中各自和協(xié)同發(fā)揮的重要作用。#p#分頁標題#e#
2．3標記于基因治療載體用于探究基因治療機制和評價治療效果
將一個或多個目的基因安全有效地轉(zhuǎn)入體內(nèi)靶細胞可用于基因治療，應用螢光素酶基因作為報告基因構(gòu)建載體，觀察目的基因是否能夠在試驗動物體內(nèi)持續(xù)高效和特異性表達。這種非侵入方式具有容易準備、低毒性及輕微免疫反應的優(yōu)點。螢光素酶基因也可以插入脂質(zhì)體包裹的DNA分子中，用來觀察脂質(zhì)體為載體的DNA運輸和基因治療情況。Smith等[28]已經(jīng)運用該技術進行了HSV作為肝臟疾病基因治療載體的可行性研究。Chou等[29]將帶有螢光素酶基因標記的穩(wěn)定表達肝細胞癌抗原的質(zhì)粒轉(zhuǎn)入沙門菌減毒株，并作為疫苗口服免疫模型小鼠，在體成像顯示了體內(nèi)沙門菌成功表達抗原和沙門菌作為活菌疫苗在體內(nèi)的清除過程。
2．4蛋白質(zhì)間相互作用、信號轉(zhuǎn)導等的研究
蛋白片段互補策略廣泛用于研究細胞內(nèi)蛋白質(zhì)間的相互作用，這種策略在借助在體生物發(fā)光成像技術后就可以被運用到活體動物內(nèi)，以非侵入、可量化、實時地顯示蛋白質(zhì)之間的相互作用[31]。在動物體內(nèi)直接觀察細胞中或活體動物體內(nèi)2種蛋白質(zhì)的相互作用，可將Firefly螢光素酶（Fluc）的N端與C端分離開，分別與2個可能產(chǎn)生相互作用的目的蛋白相連，并使2組蛋白由不同的載體分別誘導表達。在體的細胞內(nèi)若2個目的蛋白能靠近并結(jié)合形成完整的Fluc，則會產(chǎn)生發(fā)光信號。Andrea等[32]建立了一種轉(zhuǎn)基因報告小鼠，由特異啟動子（TgG4F（＋／－））及其轉(zhuǎn)錄反式作用因子多聯(lián)體蛋白Gal4進行調(diào)控。將融合了Gal4BD的p53和融合了VP16的TAg的病毒載體共轉(zhuǎn)入該小鼠的肝臟細胞，在小鼠肝臟部位觀察到了明顯的發(fā)光信號，顯示p53與TAg的結(jié)合引發(fā)Gal4BD與VP16結(jié)合，結(jié)合的多聯(lián)蛋白順利與啟動子TgG4F（＋／－）結(jié)合，進而引發(fā)Fluc在肝臟組織的表達。
2．5體內(nèi)干擾RNA及DNA疫苗的研究
目前RNA干擾技術已經(jīng)發(fā)展成為一種體外轉(zhuǎn)錄后沉默基因的方法，在體內(nèi)RNA干擾的轉(zhuǎn)錄后表達沉默可以引起各種廣泛的生物學效應，因此生物發(fā)光在體成像技術有力地促進了體內(nèi)RNA干擾的研究和在體內(nèi)利用RNA干擾技術進行其他疾病機理及生物治療的探索。McCaffrey[33]等通過將表達螢光素酶的真核表達載體與針對螢光素酶基因設計的雙鏈小干擾RNA（siRNA）共注射成年小鼠，與對照組比較，前者的熒光強度明顯減弱，表明針對性的雙鏈siRNA明顯起到抑制基因表達的作用。他們還構(gòu)建表達功能性小發(fā)夾RNA（shRNA）的真核表達載體，與表達螢光素酶的載體共注射成體小鼠，與對照組相比，同樣觀察到長時程后熒光強度明顯減弱。RNA干擾技術成功用于臨床治療須保證雙鏈siRNA有效轉(zhuǎn)入體內(nèi)并維持有效的濃度，而借助在體生物發(fā)光成像技術則可便捷準確地評價雙鏈siRNA運送方法的效果。Takeshita等[34－36]已利用該技術分別對各自所設計的不同的雙鏈siRNA運送方法進行了全面的評價，并發(fā)現(xiàn)合理的運送方法，如雙鏈siRNA與某些小分子化合物的連接修飾與單獨的注射雙鏈siRNA相比，前者能使雙鏈siRNA在體內(nèi)較長時間內(nèi)不被降解。RNA干擾可作為傳統(tǒng)DNA疫苗的補充，被用以在體內(nèi)消除免疫抑制因子表達。DNA疫苗的效應常常因相關的信號轉(zhuǎn)導途徑下調(diào)該獲得性免疫反應而受到限制。因此，免疫抑制性的信號途徑的沉默將是DNA疫苗效能得到加強的一種極有潛力的策略。Huang等[37]應用在體生物發(fā)光技術所做的研究結(jié)果顯示，皮下注射編碼shRNA的DNA，可以作為體內(nèi)基因沉默和一種能夠有效提高DNA疫苗效果的手段。
2．6標記于轉(zhuǎn)基因載體建立轉(zhuǎn)基因動物模型
2．6．1基因表達動物模型為研究目的基因是在何時、何種刺激下表達的，可將螢光素酶基因插入目的基因啟動子的下游，并穩(wěn)定整合于實驗動物染色體中，形成轉(zhuǎn)基因動物模型?？捎糜谘芯縿游锇l(fā)育過程中特定基因的時空表達情況，觀察藥物誘導特定基因表達及其他生物事件引起的相應基因表達或關閉。Chen等[37]將受胰島素調(diào)控啟動子調(diào)控表達螢光素酶的轉(zhuǎn)基因小鼠制成糖尿病小鼠模型，采用在體生物發(fā)光成像技術證實了肝臟組織中含有可生成胰島素的細胞。研究結(jié)果也證實了在轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列和反式轉(zhuǎn)錄因子與目的基因相同的情況下，螢光素酶的表達水平及底物發(fā)光強度能夠真實反映目的基因的表達狀況。目前對于調(diào)控多藥耐藥性基因－1（mdr－1a）表達的關鍵因子和胞內(nèi)微環(huán)境的機制尚不明了，使多藥耐藥性依然成為對癌癥患者成功化療的一大障礙。為深入研究mdr－1a在體內(nèi)組織中轉(zhuǎn)錄調(diào)控的機制，Long等[38]通過胚胎干細胞同源重組、遺傳雜交的手段構(gòu)建了基因型為mdr－1a＋／Fluc的轉(zhuǎn)基因小鼠（野生型基因型為mdr－1a＋／＋）。mdr－1a＋／Fluc中Fluc已完全置于mdr－1a開放讀碼框中，其表達受內(nèi)源性mdr－1a啟動子及相應各種反式作用因子的調(diào)控，Western印跡等不同方法均驗證了該模型mdr－1a的表達量與Firefly螢光素酶蛋白表達、發(fā)光強度成正比。該小鼠體內(nèi)Fluc的表達與mdr－1a的表達在時間、所處的微環(huán)境均完全一致，可作為研究各種因素下mdr－1a表達調(diào)控的理想的動物模型。類似的研究所建立的模型能彌補體外細胞培養(yǎng)不能提供的特定基因表達的真實微環(huán)境的缺點，也能彌補基因敲除小鼠存在的代償效應等不足[39]。
2．6．2各種疾病模型研究者根據(jù)研究目的，將致病基因、病毒及細菌進行螢光素酶標記，轉(zhuǎn)入動物體內(nèi)形成所需的疾病模型，包括免疫系統(tǒng)疾病、感染疾病等。除可提供靶基因在體內(nèi)的實時表達和對候選藥物的準確反應，還可以用來評估候選藥物和其他化合物的毒性，為藥物在疾病中的作用機制及效用提供研究方法。Hsieh[40－41]等將受前列腺特異性抗原啟動子調(diào)控表達螢光素酶轉(zhuǎn)基因小鼠（sPSA－Luc），與前列腺癌轉(zhuǎn)基因模型小鼠TRAMP雜交，經(jīng)檢測篩選得到的子代小鼠TRAMP－Luc隨前列腺特異性抗原的表達穩(wěn)定產(chǎn)生螢光素酶。因此，該小鼠借助在體生物發(fā)光成像技術已被成功地用于前列腺癌的發(fā)生及轉(zhuǎn)移研究。
3在體生物發(fā)光成像技術的發(fā)展趨勢
近年來針對生物發(fā)光成像過程的三大要素，即螢光素酶、底物、成像設備的研究不斷取得新進展。研究人員應用遺傳學手段，在基因、蛋白水平對各種螢光素酶的分子結(jié)構(gòu)進行改造，獲得了新的螢光素酶，使底物發(fā)光的波長發(fā)生明顯的紅移（使發(fā)光波長變長）從而減少了光穿透機體組織時的光吸收，提高了螢光素酶在哺乳動物細胞中表達的穩(wěn)定性，改變了酶在組織細胞中的半衰期。與原先的天然螢光素酶相比，通過改進得到的各種螢光素酶在體內(nèi)表達的穩(wěn)定性、催化底物的反應等方面得到了優(yōu)化，不僅增加了發(fā)光輸出量，更能適應不同時程的成像方式[42－46]。各種螢光素酶與體內(nèi)不同組織對應著獨特的動力學特征。研究人員試圖通過優(yōu)化發(fā)光底物轉(zhuǎn)入體內(nèi)的方式、底物在體內(nèi)的釋放方式、對細胞內(nèi)底物攝入相關蛋白加以限制，以及對底物本身的結(jié)構(gòu)加以改造等手段，來滿足體內(nèi)不同時程生物過程的動態(tài)性研究。Kheirolomoom等[47]分別用長循環(huán)脂質(zhì)體和溫度敏感型脂質(zhì)體包裹螢光素并轉(zhuǎn)入體內(nèi)。前者螢光素酶以一定水平正常表達時發(fā)光完全依賴于體內(nèi)螢光素的釋放。今后，通過選擇合適的包裹材料（如設計合理的脂質(zhì)體）或其他運載方式（如植入性微滲透泵[48]），可能使底物在體內(nèi)較長時間內(nèi)保持相對恒定的釋放速率，使底物濃度保持穩(wěn)定。#p#分頁標題#e#
這樣，發(fā)光強度在一定時間內(nèi)完全取決于螢光素酶的表達水平。而溫度敏感型脂質(zhì)體可以被直接運到腫瘤組織中，通過一次超聲熱處理，可以引發(fā)一次爆發(fā)式快速釋放，這種溫度敏感型脂質(zhì)體則可以實現(xiàn)定點轉(zhuǎn)入和定點釋放底物。螢光素酶底物進入細胞的過程受細胞內(nèi)某些自身蛋白的影響。Zhang等[49]發(fā)現(xiàn)ABC家族的乳腺癌耐性蛋白（ABCG2／BCRP）作為重要的膜轉(zhuǎn)運蛋白，其表達水平和特異結(jié)構(gòu)域的功能影響螢光素的攝入過程，因而影響生物發(fā)光信號的產(chǎn)出。這就提示，一方面可通過降低或消除此類蛋白對底物進入靶細胞的影響，使發(fā)光信號相對地最大化，另一方面可被用于高效篩選針對ABCG2／BCRP的藥物抑制劑[50]。從某些細菌得到的螢光素酶基因均位于一個操縱子內(nèi)，且操縱子內(nèi)除含有螢光素酶基因外，還包含整套底物合成酶基因，因此，將該操縱子穩(wěn)定轉(zhuǎn)入的細菌侵染動物模型后，無需外源底物就能實現(xiàn)成像[51]。若將這類細菌來源的螢光素酶應用于動物細胞，可能更有利于在體發(fā)光成像。但這是否可行，目前尚未見相關報道。成像設備方面的進展不僅提高了設備的靈敏度，而且使功能更加全面，數(shù)據(jù)采集與分析更加精確。例如，已經(jīng)應用三維成像技術使信號定位更明確、分析更全面。隨著在體生物發(fā)光成像技術的逐步成熟，必將使其更廣泛地應用于生物醫(yī)學研究的各領域。
