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  • 全反式維甲酸對人結腸癌LoVo細胞化療藥物敏感性及Survivin基因表達的影響

    作者:胡寶光; 鄭宗珩; 衛(wèi)洪波; 韓曉燕; 魏波; 黃江龍 中山大學附屬第三醫(yī)院胃腸外科; 廣州510630

    摘要:目的 探討全反式維甲酸(ATRA)對人結腸癌LoVo細胞化療藥物敏感性及Survivin表達的影響,為ATRA的臨床應用提供理論依據(jù).方法 應用流式細胞儀檢測經(jīng)不同濃度(10-5、10-6、10-7mol/L)的ATRA作用不同時間(24、48、72 h及第5、9、15天)后結腸癌LoVo細胞的周期變化.將細胞分為ATRA組(10-6mol/L)和對照組(RPMI1640培養(yǎng)液常規(guī)培養(yǎng)),每組中分設不同濃度的5-氟尿嘧啶(5-FU,0、2、4、6 g/L)和絲裂霉素(MMC,0、200、400、600 mg/L)組,MTT法測定其活性,用以分析細胞對化療藥物敏感性變化,并利用交互效應分析藥物之間的相互作用.應用吖啶橙(AO)和溴化乙錠(EB)染色觀察對照組(RPMI1640培養(yǎng)液)、ATRA組(10-6mol/L)、5-FU組(4 g/L)、MMC組(400 mg/L)及ATRA(10+mol/L)+5.FU(4 g/L)組、ATRA(10-6 mol/L)+MMC(400 mg/L)組的細胞凋亡情況.免疫熒光技術測定對照組(RPMI1640培養(yǎng)液)和ATRA組(10-6mol/L)細胞中Survivin基因的表達.結果 與對照組相比,不同濃度ATRA作用24 h后,Go-G1期細胞比例增加,48 h后達最高值,其后逐漸下降,而S期+G2.M期細胞比例則下降,48 h后達最低值,其后逐漸升高;在相同時間點,10-6mol/LATRA作用最明顯.與對照組相比,10-6mol/LATRA降低了細胞存活率(P<0.05).對照組各濃度的5-FU細胞存活率明顯高于ATRA組(均P<0.05).而對照組加入不同濃度MMC后,在200 mg/L MMC濃度水平,細胞存活率低于ATRA組(0.72±0.02比1.03±0.13,P<0.05),但在400、600 mg/L MMC濃度水平,兩組差異無統(tǒng)計學意義(0.52±0.05比0.39±0.02,0.36±0.02比0.36±0.01,均P>0.05).10-6西mol/L ATRA分別與5-FU(2、4、6 g/L)、MMC(200、400mg/L)存在正交互效應.與對照組、ATRA組、5-FU組、MMC組相比,熒光顯微鏡下ATRA+5-FU組、ATRA+MMC組的細胞出現(xiàn)明顯的體積縮小,核固縮,染色質濃集并形成凋亡小體.與對照組相比,10-6mol/L ATRA作用48 h后細胞Sur

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