摘要：背景:近年來(lái)國(guó)外使用超臨界流體進(jìn)行生物材料處理的研究較多,但是超臨界流體應(yīng)用于骨組織清洗的研究少見,國(guó)內(nèi)相關(guān)報(bào)道更少。目的:評(píng)估超臨界二氧化碳萃取技術(shù)處理豬股骨松質(zhì)骨的有效性及對(duì)骨生物學(xué)性能的影響。方法:分別制備超臨界二氧化碳萃取前(對(duì)照組)及萃取后豬股骨骨塊(實(shí)驗(yàn)組),檢測(cè)兩組骨密度、微觀結(jié)構(gòu)、最大抗壓強(qiáng)度、彈性模量、骨組織組成成分、膠原含量與組織學(xué)分析。將骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分別接種于兩組骨塊上,培養(yǎng)1 d后,掃描電鏡觀察材料骨小梁微孔結(jié)構(gòu)及骨材料-細(xì)胞復(fù)合物中細(xì)胞黏附及生長(zhǎng)情況。將兩組骨塊分別植入SD大鼠皮下,術(shù)后1,2,4周組織學(xué)觀察皮下包埋炎癥反應(yīng)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方案已經(jīng)解放軍總醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。結(jié)果與結(jié)論:①兩組材料孔徑大小、骨密度、最大抗壓強(qiáng)度、彈性模量、膠原含量比較差異均無(wú)顯著性意義(P>0.05);②掃描電鏡顯示,對(duì)照組材料孔隙連通欠佳,有軟組織殘留;實(shí)驗(yàn)組材料孔隙相互連通、結(jié)構(gòu)完整;③傅里葉紅外光譜及X射線衍射分析顯示,兩組骨組織材料具有相似的吸收峰及衍射峰,熱重分析顯示超臨界二氧化碳萃取可減少骨組織水分含量;④蘇木精-伊紅染色顯示實(shí)驗(yàn)組骨無(wú)軟組織殘留,骨陷凹內(nèi)細(xì)胞殘留明顯減少,對(duì)照組有軟組織及細(xì)胞殘留;天狼星紅及改良Masson染色顯示實(shí)驗(yàn)組骨膠原結(jié)構(gòu)完整,胞質(zhì)成分減少,對(duì)照組胞質(zhì)成分殘留明顯;⑤掃描電鏡顯示,對(duì)照組骨無(wú)明顯細(xì)胞黏附,實(shí)驗(yàn)組骨可見明顯細(xì)胞黏附生長(zhǎng);⑥實(shí)驗(yàn)組骨組織植入皮下的血管周圍炎癥反應(yīng)明顯輕于對(duì)照組骨組織;⑦結(jié)果表明,超臨界二氧化碳萃取技術(shù)是一種有效、環(huán)保的骨組織處理技術(shù),在不影響其膠原結(jié)構(gòu)及含量、力學(xué)性能的基礎(chǔ)上,能夠有效去除豬股骨松質(zhì)骨細(xì)胞及軟組織,保留骨孔隙結(jié)構(gòu)完整,增加細(xì)胞黏附及生長(zhǎng),有效