摘要:目的建立以白念珠菌Csa2蛋白抗體為靶標(biāo)的雙抗原夾心ELISA,初步評價其鑒別診斷白念珠菌尿道感染的應(yīng)用價值。方法通過間接免疫熒光染色定位Csa2蛋白在白念珠菌菌體分布情況;應(yīng)用棋盤滴度法優(yōu)化反應(yīng)條件,建立雙抗原夾心ELISA并進(jìn)行方法學(xué)評價;檢測324例健康體檢者血清,確定該方法的cutoff值;檢測120例健康體檢者及30例念珠菌屬尿路感染患者血清,分析其診斷的靈敏性、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值。結(jié)果 Csa2蛋白是一種特異性分布在白念珠菌菌絲態(tài)表面的蛋白;以0.1 μg/mL的rCsa2蛋白為包被抗原,1∶1 000稀釋的rCsa2-HRP蛋白為檢測抗原,建立雙抗原夾心ELISA,可最低檢測1∶16 000稀釋的rCsa2蛋白免疫兔血清并不與正常兔血清發(fā)生反應(yīng);該方法的cutoff值為0.072,診斷白念珠菌尿路感染敏感性為65.2%(15/23),特異性為98.4%(125/127),陽性預(yù)測值88.2%(15/17),陰性預(yù)測值為94.0%(125/133)。結(jié)論成功建立檢測白念珠菌特異性Csa2蛋白抗體雙抗原夾心ELISA;初步評價該方法對診斷白念珠菌尿路感染具有較高的特異性,得出較高陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值;Csa2抗體靶標(biāo)對區(qū)分白念珠菌感染和定植具有一定價值。
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