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  • 抑制蛋白激酶D1表達(dá)水平對(duì)高糖誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡的影響及作用機(jī)制

    作者:楊佳偉; 胡沛; 謝進(jìn); 唐冰 湖北省荊州市中心醫(yī)院心內(nèi)科; 荊州434020

    摘要:目的:探討下調(diào)蛋白激酶D1(PKD1)對(duì)高糖環(huán)境下心肌細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制。方法:實(shí)驗(yàn)分5組:Control組(正常培養(yǎng)的H9c2細(xì)胞)、HG組(H9c2細(xì)胞高糖條件培養(yǎng)24h)、si-NC組(H9c2細(xì)胞轉(zhuǎn)染siRNA control后高糖條件培養(yǎng)24h)、si-PKD1組(H9c2細(xì)胞轉(zhuǎn)染PKD1siRNA后高糖條件培養(yǎng)24h)和si-PKD1+SB203580組[H9c2細(xì)胞轉(zhuǎn)染PKD1siRNA 12h后加入p38絲裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信號(hào)通路抑制劑SB203580,再高糖條件培養(yǎng)24h],用qRT-PCR和Western blot方法檢測(cè)各組細(xì)胞PKD1 mRNA和蛋白表達(dá)水平(si-PKD1+SB203580組除外);流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞凋亡情況,Western blot測(cè)定細(xì)胞促凋亡蛋白Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bax)的表達(dá)水平,同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞中p38MAPK及其磷酸化p-p38MAPK水平。結(jié)果:HG組細(xì)胞PKD1mRNA和蛋白水平均明顯高于Control組(P〈0.01)。與HG組比較,si-PKD1組細(xì)胞中PKD1 mRNA和蛋白表達(dá)明顯降低(P〈0.01),細(xì)胞凋亡率降低,Bax蛋白表達(dá)水平下降,細(xì)胞中p-p38MAPK水平降低(P〈0.01)。與si-PKD1組比較,siPKD1+SB203580組心肌細(xì)胞凋亡率進(jìn)一步降低,細(xì)胞中Bax蛋白水平下降,p-p38MAPK、p-p38MAPK/p38MAPK水平降低(P〈0.01)。結(jié)論:高糖誘導(dǎo)心肌細(xì)胞PKD1表達(dá),下調(diào)PKD1可能通過抑制p38MAPK信號(hào)通路激活減少高糖誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡。

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    微循環(huán)學(xué)

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