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  • 高原鼠兔瘦素蛋白乳腺特異表達(dá)載體的構(gòu)建及細(xì)胞表達(dá)

    作者:龐礴; 于鴻浩; 張湑澤; 謝玲; 付林; 趙新全; 郭松長 中國科學(xué)院西北高原生物研究所; 高原生物適應(yīng)與進(jìn)化重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 西寧810001; 中國科學(xué)院大學(xué); 北京100049; 桂林醫(yī)學(xué)院生物技術(shù)學(xué)院; 桂林541004; 青海民族大學(xué)生態(tài)環(huán)境與資源學(xué)院; 西寧810007; 溫州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院分子藥理學(xué)研究中心; 溫州325035; 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院; 長沙410128

    摘要:瘦素(Leptin)蛋白是調(diào)節(jié)機(jī)體能量代謝的關(guān)鍵因子之一。前期研究顯示高原鼠兔Leptin蛋白發(fā)生了適應(yīng)性進(jìn)化。功能實(shí)驗(yàn)表明,在溫暖或寒冷條件下高原鼠兔Leptin通過減少食物攝取和增加能量消耗調(diào)節(jié)能量平衡,顯示了其調(diào)節(jié)適應(yīng)性產(chǎn)熱過程的潛力。本研究以高原鼠兔Leptin cDNA為模板擴(kuò)增高原鼠兔obese(ob)基因編碼區(qū)序列504bp,改造并構(gòu)建哺乳動物真核細(xì)胞乳腺特異表達(dá)載體pBC1-lep,同時通過組織塊法原代培養(yǎng)建立奶山羊乳腺上皮細(xì)胞系,并通過pBC1-lep質(zhì)粒脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染及轉(zhuǎn)基因細(xì)胞的篩選,成功獲得轉(zhuǎn)染Leptin的陽性細(xì)胞。本研究為利用轉(zhuǎn)基因動物實(shí)現(xiàn)奶山羊乳腺中特異表達(dá)高原鼠兔Leptin提供了一條可能的途徑,完成了乳腺特異真核表達(dá)載體的構(gòu)建。

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